南方医科大学学报
南方醫科大學學報
남방의과대학학보
JOURNAL OF SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY
2012年
2期
239-242
,共4页
陈爱华%何非%程婧%刘福林%宋旭东%郭敬宾
陳愛華%何非%程婧%劉福林%宋旭東%郭敬賓
진애화%하비%정청%류복림%송욱동%곽경빈
干细胞%C反应蛋白质%信号转导%内皮祖细胞
榦細胞%C反應蛋白質%信號轉導%內皮祖細胞
간세포%C반응단백질%신호전도%내피조세포
目的 观察C反应蛋白(CRP)对内皮祖细胞(EPC)中Notch信号通路表达的影响.方法 密度梯度离心法获取人外周血单个核细胞并培养,FITC-荆豆凝集素Ⅰ、DiI-乙酰化低密度脂蛋白荧光双染进行鉴定.取生长7～14d EPC,分为对照组、10和20 mg/L CRP干预组,培养48 h后分别采用四氮唑溴盐比色法、改良的Boyden小室和黏附能力检测各组EPC增殖、迁移和粘附能力.采用RT-PCR检测不同浓度CRP对EPC中Notch信号通路mRNA的影响,Western blot检测各组Notch-1及其配体Jagged-1的蛋白基因表达.结果 外周血分离获取的单个核细胞经体外培养后形成了典型的EPC集落,经荧光双染证实为EPC.CRP(10、20 mg/L)组EPC数量分别为(61±3)、(54±3)个,对照组EPC数量为(71±4)个.CRP各组EPC在490nm吸光度值分别为0.287±0.046、0.211±0.042,对照组为0.386±0.044.与对照组相比,CRP各组EPC黏附数量和迁移数量均显著减少(P＜0.05).CRP处理48 h后EPC中Jagged-1和Notch-1 mRNA含量明显增加,其中10和20 mg/L组Jagged-1mRNA分别升高了3.84和10.70倍,Notch-1 mRNA分别升高了2.97和3.58倍；差异均具有统计学意义(P＜0.05).10和20 mg/L CRP处理组Jagged-1和Notch-1蛋白表达均高于对照组(P＜0.05).结论 CRP处理后EPC的Notch信号通路表达发生了显著的改变,提示该通路可能是CRP影响EPC生物学功能的机制之一.
目的 觀察C反應蛋白(CRP)對內皮祖細胞(EPC)中Notch信號通路錶達的影響.方法 密度梯度離心法穫取人外週血單箇覈細胞併培養,FITC-荊豆凝集素Ⅰ、DiI-乙酰化低密度脂蛋白熒光雙染進行鑒定.取生長7～14d EPC,分為對照組、10和20 mg/L CRP榦預組,培養48 h後分彆採用四氮唑溴鹽比色法、改良的Boyden小室和黏附能力檢測各組EPC增殖、遷移和粘附能力.採用RT-PCR檢測不同濃度CRP對EPC中Notch信號通路mRNA的影響,Western blot檢測各組Notch-1及其配體Jagged-1的蛋白基因錶達.結果 外週血分離穫取的單箇覈細胞經體外培養後形成瞭典型的EPC集落,經熒光雙染證實為EPC.CRP(10、20 mg/L)組EPC數量分彆為(61±3)、(54±3)箇,對照組EPC數量為(71±4)箇.CRP各組EPC在490nm吸光度值分彆為0.287±0.046、0.211±0.042,對照組為0.386±0.044.與對照組相比,CRP各組EPC黏附數量和遷移數量均顯著減少(P＜0.05).CRP處理48 h後EPC中Jagged-1和Notch-1 mRNA含量明顯增加,其中10和20 mg/L組Jagged-1mRNA分彆升高瞭3.84和10.70倍,Notch-1 mRNA分彆升高瞭2.97和3.58倍；差異均具有統計學意義(P＜0.05).10和20 mg/L CRP處理組Jagged-1和Notch-1蛋白錶達均高于對照組(P＜0.05).結論 CRP處理後EPC的Notch信號通路錶達髮生瞭顯著的改變,提示該通路可能是CRP影響EPC生物學功能的機製之一.
목적 관찰C반응단백(CRP)대내피조세포(EPC)중Notch신호통로표체적영향.방법 밀도제도리심법획취인외주혈단개핵세포병배양,FITC-형두응집소Ⅰ、DiI-을선화저밀도지단백형광쌍염진행감정.취생장7～14d EPC,분위대조조、10화20 mg/L CRP간예조,배양48 h후분별채용사담서추염비색법、개량적Boyden소실화점부능력검측각조EPC증식、천이화점부능력.채용RT-PCR검측불동농도CRP대EPC중Notch신호통로mRNA적영향,Western blot검측각조Notch-1급기배체Jagged-1적단백기인표체.결과 외주혈분리획취적단개핵세포경체외배양후형성료전형적EPC집락,경형광쌍염증실위EPC.CRP(10、20 mg/L)조EPC수량분별위(61±3)、(54±3)개,대조조EPC수량위(71±4)개.CRP각조EPC재490nm흡광도치분별위0.287±0.046、0.211±0.042,대조조위0.386±0.044.여대조조상비,CRP각조EPC점부수량화천이수량균현저감소(P＜0.05).CRP처리48 h후EPC중Jagged-1화Notch-1 mRNA함량명현증가,기중10화20 mg/L조Jagged-1mRNA분별승고료3.84화10.70배,Notch-1 mRNA분별승고료2.97화3.58배；차이균구유통계학의의(P＜0.05).10화20 mg/L CRP처리조Jagged-1화Notch-1단백표체균고우대조조(P＜0.05).결론 CRP처리후EPC적Notch신호통로표체발생료현저적개변,제시해통로가능시CRP영향EPC생물학공능적궤제지일.
