CAJ | 학술논문

为探讨促性腺激素释放激素(GnRH)激动剂主动免疫对绵羊腺垂体GnRH受体(GnRHR)、促卵泡激素受体(FSHR)和促黄体激素受体(LHR)表达及分布的影响,将42只5～6月龄母绵羊分为6组(n=7),即EG-Ⅰ组、EG-Ⅱ组、EG-Ⅲ组、EG-Ⅳ组、EG-Ⅴ组和对照组(CG).EG-Ⅰ、EG-Ⅱ和EG-Ⅲ组绵羊分别皮下注射200 μg、300 μg和400μg阿拉瑞林抗原,分2次皮下注射(0d和14 d),EG-Ⅳ和EG-Ⅴ组绵羊分别皮下注射200 μg和300 μg阿拉瑞林抗原,分4次皮下注射(0d、7d、14 d和21 d),对照组(CG)绵羊皮下注射2.0ml溶剂,分2次(0d和14 d).于70 d无菌切取腺垂体、子宫及卵巢,提取垂体总RNA,PCR扩增,反转录,实时荧光定量PCR(FQ-PCR)检测,免疫组织化学SP法染色.结果表明,GnRHR、FSHR和LHR mRNA PCR扩增曲线的起始循环数分别为20、28和24.5个试验组GnRHR、FSHR和LHR mRNA值均低于对照,EG-Ⅰ、EG-Ⅱ和EG-Ⅲ组的mRNA值逐渐下降；EG-Ⅳ和EG-Ⅴ组的mRNA值分别低于EG-Ⅰ和EG-Ⅱ组.GnRHR阳性染色主要分布在卵泡细胞以及卵母细胞胞质和胞核及胞膜.各组的染色强度不同,以EG-Ⅲ阳性染色最为明显.阴性对照全部为阴性.显微图像的绿色值和亮度无显著差异,各组灰度值差异显著(P＜0.05),以EG-Ⅱ均为最小,EG-Ⅴ最高.EG-Ⅰ的饱和度最小(P＜0.05),EG-Ⅲ最高.上述结果说明阿拉瑞林抗原免疫抑制垂体GnRHR、FSHR和LHR mRNA表达,GnRHR阳性染色主要在卵母细胞和卵泡细胞的胞核和胞质.阿拉瑞林免疫可抑制卵巢GnRHR的分布与表达,增加注射剂量和次数作用更明显.
위탐토촉성선격소석방격소(GnRH)격동제주동면역대면양선수체GnRH수체(GnRHR)、촉란포격소수체(FSHR)화촉황체격소수체(LHR)표체급분포적영향,장42지5～6월령모면양분위6조(n=7),즉EG-Ⅰ조、EG-Ⅱ조、EG-Ⅲ조、EG-Ⅳ조、EG-Ⅴ조화대조조(CG).EG-Ⅰ、EG-Ⅱ화EG-Ⅲ조면양분별피하주사200 μg、300 μg화400μg아랍서림항원,분2차피하주사(0d화14 d),EG-Ⅳ화EG-Ⅴ조면양분별피하주사200 μg화300 μg아랍서림항원,분4차피하주사(0d、7d、14 d화21 d),대조조(CG)면양피하주사2.0ml용제,분2차(0d화14 d).우70 d무균절취선수체、자궁급란소,제취수체총RNA,PCR확증,반전록,실시형광정량PCR(FQ-PCR)검측,면역조직화학SP법염색.결과표명,GnRHR、FSHR화LHR mRNA PCR확증곡선적기시순배수분별위20、28화24.5개시험조GnRHR、FSHR화LHR mRNA치균저우대조,EG-Ⅰ、EG-Ⅱ화EG-Ⅲ조적mRNA치축점하강；EG-Ⅳ화EG-Ⅴ조적mRNA치분별저우EG-Ⅰ화EG-Ⅱ조.GnRHR양성염색주요분포재란포세포이급란모세포포질화포핵급포막.각조적염색강도불동,이EG-Ⅲ양성염색최위명현.음성대조전부위음성.현미도상적록색치화량도무현저차이,각조회도치차이현저(P＜0.05),이EG-Ⅱ균위최소,EG-Ⅴ최고.EG-Ⅰ적포화도최소(P＜0.05),EG-Ⅲ최고.상술결과설명아랍서림항원면역억제수체GnRHR、FSHR화LHR mRNA표체,GnRHR양성염색주요재란모세포화란포세포적포핵화포질.아랍서림면역가억제란소GnRHR적분포여표체,증가주사제량화차수작용경명현.