中国应用生理学杂志
中國應用生理學雜誌
중국응용생이학잡지
2008年
1期
122-124
,共3页
吴燕%景孝堂%马鑫%范文红%范明
吳燕%景孝堂%馬鑫%範文紅%範明
오연%경효당%마흠%범문홍%범명
Ccd1基因%融合表达%多克隆抗体%ELISA
Ccd1基因%融閤錶達%多剋隆抗體%ELISA
Ccd1기인%융합표체%다극륭항체%ELISA
目的:利用大肠杆菌DH5a表达GST-Ccd1融合蛋白,并用亲和层析分离纯化,进行动物免疫制备多克隆抗体.方法:利用本室构建好的pGEX-5X-1-Ccd1-N原核表达重组质粒,转化大肠杆菌DH5a,经IPTG诱导表达,在大肠杆菌表达系统中获得可溶性表达.经谷胱甘肽Sepllarose 4B介质填充的层析柱分离纯化蛋白,制备抗原免疫动物,得到Ccd1的兔源多克隆抗体.结果:ELISA结果显示血清抗体效价可以达到1:40 000.免疫组化分析表明自制的抗体能特异性与Ccd1蛋白相互作用,可以用于实验分析.结论:制备了效价高特异性良好的抗Ccd1多克隆抗体.经实验验证获得的抗体能够满足针时Ccd1的免疫印迹和免疫组化检测的实验要求,为今后深入研究Ccd1表达的组织分布、细胞内定位及其生物学功能提供了有用的实验工具.
目的:利用大腸桿菌DH5a錶達GST-Ccd1融閤蛋白,併用親和層析分離純化,進行動物免疫製備多剋隆抗體.方法:利用本室構建好的pGEX-5X-1-Ccd1-N原覈錶達重組質粒,轉化大腸桿菌DH5a,經IPTG誘導錶達,在大腸桿菌錶達繫統中穫得可溶性錶達.經穀胱甘肽Sepllarose 4B介質填充的層析柱分離純化蛋白,製備抗原免疫動物,得到Ccd1的兔源多剋隆抗體.結果:ELISA結果顯示血清抗體效價可以達到1:40 000.免疫組化分析錶明自製的抗體能特異性與Ccd1蛋白相互作用,可以用于實驗分析.結論:製備瞭效價高特異性良好的抗Ccd1多剋隆抗體.經實驗驗證穫得的抗體能夠滿足針時Ccd1的免疫印跡和免疫組化檢測的實驗要求,為今後深入研究Ccd1錶達的組織分佈、細胞內定位及其生物學功能提供瞭有用的實驗工具.
목적:이용대장간균DH5a표체GST-Ccd1융합단백,병용친화층석분리순화,진행동물면역제비다극륭항체.방법:이용본실구건호적pGEX-5X-1-Ccd1-N원핵표체중조질립,전화대장간균DH5a,경IPTG유도표체,재대장간균표체계통중획득가용성표체.경곡광감태Sepllarose 4B개질전충적층석주분리순화단백,제비항원면역동물,득도Ccd1적토원다극륭항체.결과:ELISA결과현시혈청항체효개가이체도1:40 000.면역조화분석표명자제적항체능특이성여Ccd1단백상호작용,가이용우실험분석.결론:제비료효개고특이성량호적항Ccd1다극륭항체.경실험험증획득적항체능구만족침시Ccd1적면역인적화면역조화검측적실험요구,위금후심입연구Ccd1표체적조직분포、세포내정위급기생물학공능제공료유용적실험공구.
