法医学杂志
法醫學雜誌
법의학잡지
JOURNAL OF FORENSIC MEDICINE
2005年
4期
265-270
,共6页
孙宏钰%蔡贵庆%陆惠玲%刘超%陈丽娴%李向阳%伍新尧
孫宏鈺%蔡貴慶%陸惠玲%劉超%陳麗嫻%李嚮暘%伍新堯
손굉옥%채귀경%륙혜령%류초%진려한%리향양%오신요
线粒体DNA(mtDNA)%变性高效液相色谱(DHPLC)%多态性%异质性
線粒體DNA(mtDNA)%變性高效液相色譜(DHPLC)%多態性%異質性
선립체DNA(mtDNA)%변성고효액상색보(DHPLC)%다태성%이질성
目的基于变性高效液相色谱技术,建立一种不需测序和杂交的新的mtDNA控制区多态性分析系统.方法 mtDNA控制区序列(包括HV Ⅰ,HVⅡ和HVⅢ)被分为4个扩增片段,采用配对分析突变检测模式进行DHPLC分析.对DHPLC检测条件(包括柱温和洗脱梯度等)进行优化.对100个不同类型差异序列的组合配对以检验该方法的检测效力.结果 10组序列相同的样本配对DHPLC图谱均只显示1个样品峰.对序列相差1个碱基～7个碱基、插入(/缺失)1个碱基、插入(/缺失)2个碱基等类型的90个扩增片段组合,用DHPLC进行分析,均得到≥2个样本峰的DHPLC图谱,序列差异检出率达100%.该技术可检测的异质性DNA成分的最小百分含量为10%.结论 DHPLC-mtDNA控制区多态性分析系统快速、经济和实用,在检测mtDNA异质性方面较直接测序更灵敏.
目的基于變性高效液相色譜技術,建立一種不需測序和雜交的新的mtDNA控製區多態性分析繫統.方法 mtDNA控製區序列(包括HV Ⅰ,HVⅡ和HVⅢ)被分為4箇擴增片段,採用配對分析突變檢測模式進行DHPLC分析.對DHPLC檢測條件(包括柱溫和洗脫梯度等)進行優化.對100箇不同類型差異序列的組閤配對以檢驗該方法的檢測效力.結果 10組序列相同的樣本配對DHPLC圖譜均隻顯示1箇樣品峰.對序列相差1箇堿基～7箇堿基、插入(/缺失)1箇堿基、插入(/缺失)2箇堿基等類型的90箇擴增片段組閤,用DHPLC進行分析,均得到≥2箇樣本峰的DHPLC圖譜,序列差異檢齣率達100%.該技術可檢測的異質性DNA成分的最小百分含量為10%.結論 DHPLC-mtDNA控製區多態性分析繫統快速、經濟和實用,在檢測mtDNA異質性方麵較直接測序更靈敏.
목적기우변성고효액상색보기술,건립일충불수측서화잡교적신적mtDNA공제구다태성분석계통.방법 mtDNA공제구서렬(포괄HV Ⅰ,HVⅡ화HVⅢ)피분위4개확증편단,채용배대분석돌변검측모식진행DHPLC분석.대DHPLC검측조건(포괄주온화세탈제도등)진행우화.대100개불동류형차이서렬적조합배대이검험해방법적검측효력.결과 10조서렬상동적양본배대DHPLC도보균지현시1개양품봉.대서렬상차1개감기～7개감기、삽입(/결실)1개감기、삽입(/결실)2개감기등류형적90개확증편단조합,용DHPLC진행분석,균득도≥2개양본봉적DHPLC도보,서렬차이검출솔체100%.해기술가검측적이질성DNA성분적최소백분함량위10%.결론 DHPLC-mtDNA공제구다태성분석계통쾌속、경제화실용,재검측mtDNA이질성방면교직접측서경령민.
