中国农业科学
中國農業科學
중국농업과학
SCIENTIA AGRICULTURA SINICA
2005年
5期
1034-1039
,共6页
陈吉刚%陈维虎%周继勇%王金勇%齐静%郑肖娟%俞照正%孙红霞
陳吉剛%陳維虎%週繼勇%王金勇%齊靜%鄭肖娟%俞照正%孫紅霞
진길강%진유호%주계용%왕금용%제정%정초연%유조정%손홍하
鸡%白细胞介素-2%生物学活性%单克隆抗体%多克隆抗体%抗原捕获ELISA
鷄%白細胞介素-2%生物學活性%單剋隆抗體%多剋隆抗體%抗原捕穫ELISA
계%백세포개소-2%생물학활성%단극륭항체%다극륭항체%항원포획ELISA
将去除信号肽的鸡IL-2基因编码框克隆到原核表达载体pBAD/His B,实现了重组鸡IL-2(rchIL-2)蛋白在大肠杆菌中的高效表达.SDS-PAGE分析显示,表达蛋白的分子量约为18 kD.用rchIL-2为抗原制备了单克隆抗体和多克隆抗体,建立了检测rchIL-2含量的抗原捕获ELISA,探讨了天然chIL-2蛋白的体外表达动力学.非变性条件下纯化的rchIL-2 (0.4 ng) 对Con A活化的鸡T淋巴细胞具有明显的增殖活性,而对鸭及鹅的T淋巴细胞无增殖活性.抗chIL-2多克隆抗体可完全中和rchIL-2和天然chIL-2蛋白的生物学活性,而单克隆抗体无中和rchIL-2和天然chIL-2蛋白生物学活性的功能.这些研究结果证实,大肠杆菌表达的rchIL-2及其多克隆抗体拥有生物学功能,而获得的单克隆抗体不具有chIL-2的中和特性.
將去除信號肽的鷄IL-2基因編碼框剋隆到原覈錶達載體pBAD/His B,實現瞭重組鷄IL-2(rchIL-2)蛋白在大腸桿菌中的高效錶達.SDS-PAGE分析顯示,錶達蛋白的分子量約為18 kD.用rchIL-2為抗原製備瞭單剋隆抗體和多剋隆抗體,建立瞭檢測rchIL-2含量的抗原捕穫ELISA,探討瞭天然chIL-2蛋白的體外錶達動力學.非變性條件下純化的rchIL-2 (0.4 ng) 對Con A活化的鷄T淋巴細胞具有明顯的增殖活性,而對鴨及鵝的T淋巴細胞無增殖活性.抗chIL-2多剋隆抗體可完全中和rchIL-2和天然chIL-2蛋白的生物學活性,而單剋隆抗體無中和rchIL-2和天然chIL-2蛋白生物學活性的功能.這些研究結果證實,大腸桿菌錶達的rchIL-2及其多剋隆抗體擁有生物學功能,而穫得的單剋隆抗體不具有chIL-2的中和特性.
장거제신호태적계IL-2기인편마광극륭도원핵표체재체pBAD/His B,실현료중조계IL-2(rchIL-2)단백재대장간균중적고효표체.SDS-PAGE분석현시,표체단백적분자량약위18 kD.용rchIL-2위항원제비료단극륭항체화다극륭항체,건립료검측rchIL-2함량적항원포획ELISA,탐토료천연chIL-2단백적체외표체동역학.비변성조건하순화적rchIL-2 (0.4 ng) 대Con A활화적계T림파세포구유명현적증식활성,이대압급아적T림파세포무증식활성.항chIL-2다극륭항체가완전중화rchIL-2화천연chIL-2단백적생물학활성,이단극륭항체무중화rchIL-2화천연chIL-2단백생물학활성적공능.저사연구결과증실,대장간균표체적rchIL-2급기다극륭항체옹유생물학공능,이획득적단극륭항체불구유chIL-2적중화특성.
