昆虫学报
昆蟲學報
곤충학보
ACTA ENTOMOLOGICA SINICA
2007年
5期
528-533
,共6页
烟实夜蛾%脂肪酸结合蛋白%基因克隆%序列分析%原核表达
煙實夜蛾%脂肪痠結閤蛋白%基因剋隆%序列分析%原覈錶達
연실야아%지방산결합단백%기인극륭%서렬분석%원핵표체
应用RT-PCR技术,从烟实夜蛾Helicoverpa assulta幼虫脂肪体组织和血细胞总RNA中反转录扩增脂肪酸结合蛋白(fatty-acid binding protein,FABP)基因的cDNA片段,克隆到原核表达载体pGEX-4T-2上,转化大肠杆菌BL21(DE3),用IPTG进行诱导表达并进行检测.结果表明: 扩增得到的片段全长399 bp(GenBank登录号为DQ299942),编码132个氨基酸残基,预测分子量15.0 kD,等点电5.83.FABP融合了GST.原核表达后经电泳检测到约41 kD大小的外源蛋白,Western blot检测表明是目的蛋白.
應用RT-PCR技術,從煙實夜蛾Helicoverpa assulta幼蟲脂肪體組織和血細胞總RNA中反轉錄擴增脂肪痠結閤蛋白(fatty-acid binding protein,FABP)基因的cDNA片段,剋隆到原覈錶達載體pGEX-4T-2上,轉化大腸桿菌BL21(DE3),用IPTG進行誘導錶達併進行檢測.結果錶明: 擴增得到的片段全長399 bp(GenBank登錄號為DQ299942),編碼132箇氨基痠殘基,預測分子量15.0 kD,等點電5.83.FABP融閤瞭GST.原覈錶達後經電泳檢測到約41 kD大小的外源蛋白,Western blot檢測錶明是目的蛋白.
응용RT-PCR기술,종연실야아Helicoverpa assulta유충지방체조직화혈세포총RNA중반전록확증지방산결합단백(fatty-acid binding protein,FABP)기인적cDNA편단,극륭도원핵표체재체pGEX-4T-2상,전화대장간균BL21(DE3),용IPTG진행유도표체병진행검측.결과표명: 확증득도적편단전장399 bp(GenBank등록호위DQ299942),편마132개안기산잔기,예측분자량15.0 kD,등점전5.83.FABP융합료GST.원핵표체후경전영검측도약41 kD대소적외원단백,Western blot검측표명시목적단백.
