中国病理生理杂志
中國病理生理雜誌
중국병리생리잡지
CHINESE JOURNAL OF PATHOPHYSIOLOGY
2008年
7期
1317-1322
,共6页
伍尤华%曹校校%张蒙夏%田志臻%雷小勇%涂剑%罗红梅%唐圣松
伍尤華%曹校校%張矇夏%田誌臻%雷小勇%塗劍%囉紅梅%唐聖鬆
오우화%조교교%장몽하%전지진%뢰소용%도검%라홍매%당골송
二烯丙基三硫%NADPH氧化酶%活性氧%丙二醛%HL-60细胞
二烯丙基三硫%NADPH氧化酶%活性氧%丙二醛%HL-60細胞
이희병기삼류%NADPH양화매%활성양%병이철%HL-60세포
目的:探讨二烯丙基三硫(DATS)诱导人白血病HL-60细胞产生活性氧(ROS)及其细胞毒性作用.方法:用浓度为50、100、150、200 μmol/L DATS处理HL一60细胞1、3、6、12、24 h后,流式细胞计数法检测HL-60细胞内的ROS水平,NBT还原实验分析NADPH氧化酶的活性,分别用NADPH氧化酶特异性阻断剂apocynin与抗氧化剂NAC(N-acetyl-L-cystein)预处理30 min后,观察DATS对HL-60细胞产生活性氧的影响,分光光度法检测细胞质膜氧化产物丙二醛(MDA)与细胞蛋白氧化产物羰基化蛋白(protein carbonyl).结果:DATS能诱导人白血病HL-60细胞产生ROS,当DATS处理细胞1-3 h时,HL-60细胞产生ROS随DATS浓度的升高和处理时间的延长而升高,当浓度为150 μmol/L DATS处理细胞3h时,ROS的荧光强度达到最高峰,其后维持在一个较高水平.NADPH氧化酶活性与ROS的产生一致.HL-60细胞的脂质过氧化和羰基化蛋白浓度与DATS诱导ROS产生的趋势基本一致,都在3 h、150 pmol/L处理点达到最高值.应用NADPH氧化酶特异性阻断剂apocynin或抗氧化剂NAC后,能显著降低HL-60细胞ROS的产生和细胞损伤.结论:NADPH氧化酶是DATS诱导HL-60细胞产生ROS的主要酶系,ROS能氧化细胞质膜和蛋白质.
目的:探討二烯丙基三硫(DATS)誘導人白血病HL-60細胞產生活性氧(ROS)及其細胞毒性作用.方法:用濃度為50、100、150、200 μmol/L DATS處理HL一60細胞1、3、6、12、24 h後,流式細胞計數法檢測HL-60細胞內的ROS水平,NBT還原實驗分析NADPH氧化酶的活性,分彆用NADPH氧化酶特異性阻斷劑apocynin與抗氧化劑NAC(N-acetyl-L-cystein)預處理30 min後,觀察DATS對HL-60細胞產生活性氧的影響,分光光度法檢測細胞質膜氧化產物丙二醛(MDA)與細胞蛋白氧化產物羰基化蛋白(protein carbonyl).結果:DATS能誘導人白血病HL-60細胞產生ROS,噹DATS處理細胞1-3 h時,HL-60細胞產生ROS隨DATS濃度的升高和處理時間的延長而升高,噹濃度為150 μmol/L DATS處理細胞3h時,ROS的熒光彊度達到最高峰,其後維持在一箇較高水平.NADPH氧化酶活性與ROS的產生一緻.HL-60細胞的脂質過氧化和羰基化蛋白濃度與DATS誘導ROS產生的趨勢基本一緻,都在3 h、150 pmol/L處理點達到最高值.應用NADPH氧化酶特異性阻斷劑apocynin或抗氧化劑NAC後,能顯著降低HL-60細胞ROS的產生和細胞損傷.結論:NADPH氧化酶是DATS誘導HL-60細胞產生ROS的主要酶繫,ROS能氧化細胞質膜和蛋白質.
목적:탐토이희병기삼류(DATS)유도인백혈병HL-60세포산생활성양(ROS)급기세포독성작용.방법:용농도위50、100、150、200 μmol/L DATS처리HL일60세포1、3、6、12、24 h후,류식세포계수법검측HL-60세포내적ROS수평,NBT환원실험분석NADPH양화매적활성,분별용NADPH양화매특이성조단제apocynin여항양화제NAC(N-acetyl-L-cystein)예처리30 min후,관찰DATS대HL-60세포산생활성양적영향,분광광도법검측세포질막양화산물병이철(MDA)여세포단백양화산물탄기화단백(protein carbonyl).결과:DATS능유도인백혈병HL-60세포산생ROS,당DATS처리세포1-3 h시,HL-60세포산생ROS수DATS농도적승고화처리시간적연장이승고,당농도위150 μmol/L DATS처리세포3h시,ROS적형광강도체도최고봉,기후유지재일개교고수평.NADPH양화매활성여ROS적산생일치.HL-60세포적지질과양화화탄기화단백농도여DATS유도ROS산생적추세기본일치,도재3 h、150 pmol/L처리점체도최고치.응용NADPH양화매특이성조단제apocynin혹항양화제NAC후,능현저강저HL-60세포ROS적산생화세포손상.결론:NADPH양화매시DATS유도HL-60세포산생ROS적주요매계,ROS능양화세포질막화단백질.