鸭瘟病毒gB蛋白N端抗原域的高效表达及其免疫特性
압온병독gB단백N단항원역적고효표체급기면역특성
Prokaryotic Expression of N-terminal Antigenic Domain of Duck plague virus gB protein and Its Immunological Characteristics
  • 万方数据
    农业生物技术学报 농업생물기술학보
    JOURNAL OF AGRICULTURAL BIOTECHNOLOGY
    2008年 5期 743-747 ,共5页

    潘华奇%曹瑞兵%王楠%刘丽%刘磊%胡江春%陈溥言%王书锦

    반화기%조서병%왕남%류려%류뢰%호강춘%진부언%왕서금

    鸭瘟病毒%糖蛋白B%原核表达:抗原域%免疫原性 鴨瘟病毒%糖蛋白B%原覈錶達:抗原域%免疫原性
    압온병독%당단백B%원핵표체:항원역%면역원성
    在分析鸭瘟病毒(Duck plague virus,DPV)gB蛋白抗原性的基础上,设计1对引物克隆gB蛋白N端抗原性较好的抗原域编码基因,克隆到表达载体pET32a中,构建了原核表达质粒pET-gB1.将pET-gB1转化到感受态大肠杆菌(Escherichia coli)BL21(DE3)中,经IPTG诱导和SDS-PAGE分析,可见约42.4kD的目的蛋白以包涵体形式表达.Western blot分析发现,表达产物与抗鸭瘟的鼠阳性血清发生特异性反应.将包涵体溶解于8mol/L的尿素中,利用His-Bind试剂盒获得纯化的蛋白,将纯化的蛋白皮下注射免疫小鼠,间接ELISA法测得抗体的效价,MTT法检测免疫小鼠的T淋巴细胞增殖反应能力.结果说明,该融合蛋白能够诱导机体产生较强的体液免疫和细胞免疫.
    재분석압온병독(Duck plague virus,DPV)gB단백항원성적기출상,설계1대인물극륭gB단백N단항원성교호적항원역편마기인,극륭도표체재체pET32a중,구건료원핵표체질립pET-gB1.장pET-gB1전화도감수태대장간균(Escherichia coli)BL21(DE3)중,경IPTG유도화SDS-PAGE분석,가견약42.4kD적목적단백이포함체형식표체.Western blot분석발현,표체산물여항압온적서양성혈청발생특이성반응.장포함체용해우8mol/L적뇨소중,이용His-Bind시제합획득순화적단백,장순화적단백피하주사면역소서,간접ELISA법측득항체적효개,MTT법검측면역소서적T림파세포증식반응능력.결과설명,해융합단백능구유도궤체산생교강적체액면역화세포면역.
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