中国组织工程研究与临床康复
中國組織工程研究與臨床康複
중국조직공정연구여림상강복
JOURNAL OF CLINICAL REHABILITATIVE TISSUE ENGINEERING RESEARCH
2011年
10期
1832-1836
,共5页
王丙乾%王东%张建军%汪永新%朱国华%杜郭佳%党木仁
王丙乾%王東%張建軍%汪永新%硃國華%杜郭佳%黨木仁
왕병건%왕동%장건군%왕영신%주국화%두곽가%당목인
法舒地尔%神经干细胞%RhoA%RNA干扰%干细胞
法舒地爾%神經榦細胞%RhoA%RNA榦擾%榦細胞
법서지이%신경간세포%RhoA%RNA간우%간세포
背景:Rho及其相关分子在神经轴突生长、分化、延伸及突触形成中起重要作用,阻断和抑制RhoA/ROCK通路可促进神经干细胞的增殖与生长.目的:观察Rho激酶抑制剂法舒地尔和RNAi介导的RhoA基因沉默对大鼠神经干细胞增殖的影响.方法:体外培养Wistar胎鼠神经干细胞,分6组干预:空白对照组,5,10,15,20 μmol/L 法舒地尔组,siRNA 沉默RhoA基因组.干预后第3天,采用RT-PCR,Western blot检测各组神经干细胞RhoA基因及蛋白的表达.应用MTT比色法观察神经干细胞增殖情况;采用流式细胞术测定神经干细胞周期分布的变化.结果与结论:15,20 μmol/L 法舒地尔组、siRNA 沉默RhoA基因组神经干细胞RhoA基因及蛋白表达量较5,10 μmol/L 法舒地尔组、空白对照组明显降低(P < 0.05),细胞的生长速度较5,10 μmol/L 法舒地尔组、空白对照组明显增快(P < 0.05),细胞周期G0/G1期减少(P < 0.05),S期细胞数增多(P < 0.05).当法舒地尔浓度增加到20 μmol/L时对细胞的作用并非随浓度的增加而增强,与15 μmol/L组的差异无显著性意义(P > 0.05).15,20 μmol/L 法舒地尔组与siRNA 沉默RhoA基因组相比差异无显著性意义(P > 0.05).说明Rho激酶抑制剂法舒地尔和RNAi介导的RhoA基因沉默在体外均能促进神经干细胞增殖,法舒地尔最佳作用浓度为15 μmol/L.
揹景:Rho及其相關分子在神經軸突生長、分化、延伸及突觸形成中起重要作用,阻斷和抑製RhoA/ROCK通路可促進神經榦細胞的增殖與生長.目的:觀察Rho激酶抑製劑法舒地爾和RNAi介導的RhoA基因沉默對大鼠神經榦細胞增殖的影響.方法:體外培養Wistar胎鼠神經榦細胞,分6組榦預:空白對照組,5,10,15,20 μmol/L 法舒地爾組,siRNA 沉默RhoA基因組.榦預後第3天,採用RT-PCR,Western blot檢測各組神經榦細胞RhoA基因及蛋白的錶達.應用MTT比色法觀察神經榦細胞增殖情況;採用流式細胞術測定神經榦細胞週期分佈的變化.結果與結論:15,20 μmol/L 法舒地爾組、siRNA 沉默RhoA基因組神經榦細胞RhoA基因及蛋白錶達量較5,10 μmol/L 法舒地爾組、空白對照組明顯降低(P < 0.05),細胞的生長速度較5,10 μmol/L 法舒地爾組、空白對照組明顯增快(P < 0.05),細胞週期G0/G1期減少(P < 0.05),S期細胞數增多(P < 0.05).噹法舒地爾濃度增加到20 μmol/L時對細胞的作用併非隨濃度的增加而增彊,與15 μmol/L組的差異無顯著性意義(P > 0.05).15,20 μmol/L 法舒地爾組與siRNA 沉默RhoA基因組相比差異無顯著性意義(P > 0.05).說明Rho激酶抑製劑法舒地爾和RNAi介導的RhoA基因沉默在體外均能促進神經榦細胞增殖,法舒地爾最佳作用濃度為15 μmol/L.
배경:Rho급기상관분자재신경축돌생장、분화、연신급돌촉형성중기중요작용,조단화억제RhoA/ROCK통로가촉진신경간세포적증식여생장.목적:관찰Rho격매억제제법서지이화RNAi개도적RhoA기인침묵대대서신경간세포증식적영향.방법:체외배양Wistar태서신경간세포,분6조간예:공백대조조,5,10,15,20 μmol/L 법서지이조,siRNA 침묵RhoA기인조.간예후제3천,채용RT-PCR,Western blot검측각조신경간세포RhoA기인급단백적표체.응용MTT비색법관찰신경간세포증식정황;채용류식세포술측정신경간세포주기분포적변화.결과여결론:15,20 μmol/L 법서지이조、siRNA 침묵RhoA기인조신경간세포RhoA기인급단백표체량교5,10 μmol/L 법서지이조、공백대조조명현강저(P < 0.05),세포적생장속도교5,10 μmol/L 법서지이조、공백대조조명현증쾌(P < 0.05),세포주기G0/G1기감소(P < 0.05),S기세포수증다(P < 0.05).당법서지이농도증가도20 μmol/L시대세포적작용병비수농도적증가이증강,여15 μmol/L조적차이무현저성의의(P > 0.05).15,20 μmol/L 법서지이조여siRNA 침묵RhoA기인조상비차이무현저성의의(P > 0.05).설명Rho격매억제제법서지이화RNAi개도적RhoA기인침묵재체외균능촉진신경간세포증식,법서지이최가작용농도위15 μmol/L.
