CAJ | 학술논문

目的探讨人血小板裂解液(human platelet lysates,HPL)对骨髓间质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)增殖以及生物学特性的影响.方法通过对机采血小板反复冻融获得HPL,采用密度梯度离心法从骨髓中分离MSCs,分别用10％胎牛血清(feotal calf serum,FCS)和LD-DMEM添加不同浓度的HPL进行培养,以确定最佳HPL浓度.分离6株人源MSCs,从原代开始分别用添加胎牛血清和最佳HPL浓度的LD-DMEM进行培养,对两种培养体系下6株不同来源的MSCs的增殖能力,表面标记表达量以及细胞周期进行研究,并利用t-test进行统计学分析,P＜0.05视为有统计学差异.结果　研究发现HPL中含有MSCs生长所必需的4种生长因子,PDGF-AB(人血小板衍生生长因子AB),bFGF(成纤维细胞生长因子),IGF-1（胰岛素样生长因子1）,TGF-β1（转化生长因子β1）,浓度分别为:(0.53+0.06)ng/ml,（37.5+4.31）pg/ml,(0.15+0.06) mg/ml,(5150±463)pg/ml.适合MSCs增殖的最佳HPL浓度为7.5％.两种培养条件下的细胞形态无明显区别,均为长梭形.8代以前,细胞增殖能力没有显著性差异(P＞0.05),两种培养条件下的MSCs均表达CD105,CD106以及粘附分子CD29和CD44,不表达CD34,CD45,且其表达量没有显著性差异(P＞0.05).两种培养体系下绝大多数细胞处于G0-G1期,FCS培养的MSCs其G0-G1期占(96.97±0.95)％,7.5％的HPL培养的MSCs其G0-G1期占(94.58±1.56)％,两种培养条件下不同周期没有显著性差异(P＞0.05).结论　本研究适合MSCs增殖的最佳HPL浓度为7.5％,HPL可以替代胎牛血清体外培养扩增人骨髓间质干细胞,并保持其生物学特性基本不变.
목적 탐토인혈소판렬해액(human platelet lysates,HPL)대골수간질간세포(mesenchymal stem cells,MSCs)증식이급생물학특성적영향.방법 통과대궤채혈소판반복동융획득HPL,채용밀도제도리심법종골수중분리MSCs,분별용10％태우혈청(feotal calf serum,FCS)화LD-DMEM첨가불동농도적HPL진행배양,이학정최가HPL농도.분리6주인원MSCs,종원대개시분별용첨가태우혈청화최가HPL농도적LD-DMEM진행배양,대량충배양체계하6주불동래원적MSCs적증식능력,표면표기표체량이급세포주기진행연구,병이용t-test진행통계학분석,P＜0.05시위유통계학차이.결과　연구발현HPL중함유MSCs생장소필수적4충생장인자,PDGF-AB(인혈소판연생생장인자AB),bFGF(성섬유세포생장인자),IGF-1（이도소양생장인자1）,TGF-β1（전화생장인자β1）,농도분별위:(0.53+0.06)ng/ml,（37.5+4.31）pg/ml,(0.15+0.06) mg/ml,(5150±463)pg/ml.괄합MSCs증식적최가HPL농도위7.5％.량충배양조건하적세포형태무명현구별,균위장사형.8대이전,세포증식능력몰유현저성차이(P＞0.05),량충배양조건하적MSCs균표체CD105,CD106이급점부분자CD29화CD44,불표체CD34,CD45,차기표체량몰유현저성차이(P＞0.05).량충배양체계하절대다수세포처우G0-G1기,FCS배양적MSCs기G0-G1기점(96.97±0.95)％,7.5％적HPL배양적MSCs기G0-G1기점(94.58±1.56)％,량충배양조건하불동주기몰유현저성차이(P＞0.05).결론　본연구괄합MSCs증식적최가HPL농도위7.5％,HPL가이체대태우혈청체외배양확증인골수간질간세포,병보지기생물학특성기본불변.