CAJ | 학술논문

叉头框转录因子O 亚族1 (forkhead box transcription factor O1,FoxOl)在细胞增殖、分化过程中发挥重要的作用.为了阐明其磷酸化水平对猪前体脂肪细胞分化的影响及其分子机理,本研究分离培养猪前体脂肪细胞,用FoxO1的激活剂渥曼青霉素(wortmannin,WM)处理后,采用油红O染色、油红O化学比色法检测猪前体脂肪细胞分化情况,运用qRT-PCR和Western blot方法分析FoxO1及脂肪细胞分化标志基因mRNA和蛋白的表达情况.结果显示,随着脂肪细胞分化,FoxO lmRNA和蛋白水平以及磷酸化的FoxO1(p-FoxO1)蛋白水平明显升高；WM处理猪前体脂肪细胞后第5天FoxO1蛋白的表达较对照组显著升高(P＜0.05),而FoxO1蛋白磷酸化水平显著下降,FoxOI mRNA表达水平无显著变化(P＞0.05)；油红O染色结果显示,脂肪细胞分化受到显著抑制(P＜0.05)；脂肪细胞分化标志基因PPARγ和C/EBPα mRNA表达显著低于对照组(P＜0.05).研究结果提示,WM能降低FoxO1的磷酸化水平,并通过降低PPARγ和C/EBPα mRNA表达来抑制猪前体脂肪细胞分化.FoxO1去磷酸化可以抑制猪前体脂肪细胞分化.
차두광전록인자O 아족1 (forkhead box transcription factor O1,FoxOl)재세포증식、분화과정중발휘중요적작용.위료천명기린산화수평대저전체지방세포분화적영향급기분자궤리,본연구분리배양저전체지방세포,용FoxO1적격활제악만청매소(wortmannin,WM)처리후,채용유홍O염색、유홍O화학비색법검측저전체지방세포분화정황,운용qRT-PCR화Western blot방법분석FoxO1급지방세포분화표지기인mRNA화단백적표체정황.결과현시,수착지방세포분화,FoxO lmRNA화단백수평이급린산화적FoxO1(p-FoxO1)단백수평명현승고；WM처리저전체지방세포후제5천FoxO1단백적표체교대조조현저승고(P＜0.05),이FoxO1단백린산화수평현저하강,FoxOI mRNA표체수평무현저변화(P＞0.05)；유홍O염색결과현시,지방세포분화수도현저억제(P＜0.05)；지방세포분화표지기인PPARγ화C/EBPα mRNA표체현저저우대조조(P＜0.05).연구결과제시,WM능강저FoxO1적린산화수평,병통과강저PPARγ화C/EBPα mRNA표체래억제저전체지방세포분화.FoxO1거린산화가이억제저전체지방세포분화.