CAJ | 학술논문

本试验旨在克隆并表达中国荷斯坦奶牛髓样分化蛋白-2(myeloid differentiation protein-2,MD-2)基因,并用West-ern blotting进行鉴定.采用RT-PCR技术从中国荷斯坦奶牛外周血白细胞中扩增MD-2 cDNA,并将扩增产物与pMD20-T载体连接,重组质粒经测序鉴定后,构建pET28a-MD-2重组质粒,转化大肠杆菌BL21 (DE3),经IPTG诱导表达后进行SDS-PAGE和Western blotting分析.结果表明,目的基因含有1个483 bp的开放阅读框,编码161个氨基酸;与黄牛、黑猩猩和小鼠MD-2的cDNA序列同源性分别为99.38％、77.02％、68.12％,氨基酸同源性分别为98.75％、65.00％和58.13％.融合蛋白以包涵体的形式存在,分子质量约为25 ku.说明本研究成功克隆并表达了中国荷斯坦奶牛MD-2 cDNA,为其进一步的功能研究提供了理论依据.
본시험지재극륭병표체중국하사탄내우수양분화단백-2(myeloid differentiation protein-2,MD-2)기인,병용West-ern blotting진행감정.채용RT-PCR기술종중국하사탄내우외주혈백세포중확증MD-2 cDNA,병장확증산물여pMD20-T재체련접,중조질립경측서감정후,구건pET28a-MD-2중조질립,전화대장간균BL21 (DE3),경IPTG유도표체후진행SDS-PAGE화Western blotting분석.결과표명,목적기인함유1개483 bp적개방열독광,편마161개안기산;여황우、흑성성화소서MD-2적cDNA서렬동원성분별위99.38％、77.02％、68.12％,안기산동원성분별위98.75％、65.00％화58.13％.융합단백이포함체적형식존재,분자질량약위25 ku.설명본연구성공극륭병표체료중국하사탄내우MD-2 cDNA,위기진일보적공능연구제공료이론의거.