中华微生物学和免疫学杂志
中華微生物學和免疫學雜誌
중화미생물학화면역학잡지
CHINESE JOURNAL OF MICROBIOLOGY AND IMMUNOLOGY
2008年
11期
1020-1023
,共4页
马丽颖%钟曦%岳秉飞%贺争鸣%刘双环
馬麗穎%鐘晞%嶽秉飛%賀爭鳴%劉雙環
마려영%종희%악병비%하쟁명%류쌍배
乙肝疫苗%免疫应答%H-2%NIH小鼠
乙肝疫苗%免疫應答%H-2%NIH小鼠
을간역묘%면역응답%H-2%NIH소서
Hepatitis B vaccine%Immune responses%H-2%NIH mouse
目的 研究实验小鼠基因型与乙肝疫苗免疫应答的关系.以保证根据小鼠基因型选择适于进行免疫应答检测的实验小鼠,保证进行疫苗免疫应答检测时的规范化和标准化.方法 应用小鼠NIH1、2、3个种群和BALB/c、DBA/1共3种不同品系和同一品系不同种群的小鼠各40只,乙肝疫苗稀释4个不同的稀释度,每个稀释度注射动物10只.酶标法检测乙肝疫苗免疫效力,测定乙肝疫苗的半数有效剂量(ED50)值,再通过微量细胞毒法和PCR方法 检测小鼠的H-2单倍型,计算不同品系小鼠H-2q的百分比,得出乙肝疫苗与不同动物种群的相关性.结果 重组乙肝疫苗(酿酒酵母)经BALB/c鼠检测疫苗的ED50值为2.5μg/ml;经1号种群NIH鼠检测疫苗的ED50值为2.0μg/ml;经2号种群NIH鼠检测疫苗的EDM50值为1.3μg/ml;经3号种群NIH鼠检测疫苗的ED50值为2.3μg/ml;经上海某公司DBA/1鼠检测疫苗的ED50值为0.8μg/ml,对乙肝疫苗的效力反应最强.根据<中国药典>2005年版三部的规定,疫苗的ED50值为≤1.5μg/ml.所以得出的结果 是2号种群NIH鼠和DBA/1鼠检测疫苗是合格的.基因检测结果 DBA/1为H-2q近交系小鼠,2号种群NIH鼠含有H-2q型基因的百分比是96%,3号种群NIH鼠含有H-2q型基因的百分比是30%,而1号种群NIH小鼠含有H-2q型基因百分比为56%,因此DBA/1小鼠和2号种群NIH鼠对乙肝疫苗均产生高应答效应,且远远高于免疫基因型为H-2d的BALB/c小鼠.结论 在进行乙肝疫苗效力鉴定时选择含有q型基因较多的NIH小鼠作为检测动物可以取得较好的应答效果.
目的 研究實驗小鼠基因型與乙肝疫苗免疫應答的關繫.以保證根據小鼠基因型選擇適于進行免疫應答檢測的實驗小鼠,保證進行疫苗免疫應答檢測時的規範化和標準化.方法 應用小鼠NIH1、2、3箇種群和BALB/c、DBA/1共3種不同品繫和同一品繫不同種群的小鼠各40隻,乙肝疫苗稀釋4箇不同的稀釋度,每箇稀釋度註射動物10隻.酶標法檢測乙肝疫苗免疫效力,測定乙肝疫苗的半數有效劑量(ED50)值,再通過微量細胞毒法和PCR方法 檢測小鼠的H-2單倍型,計算不同品繫小鼠H-2q的百分比,得齣乙肝疫苗與不同動物種群的相關性.結果 重組乙肝疫苗(釀酒酵母)經BALB/c鼠檢測疫苗的ED50值為2.5μg/ml;經1號種群NIH鼠檢測疫苗的ED50值為2.0μg/ml;經2號種群NIH鼠檢測疫苗的EDM50值為1.3μg/ml;經3號種群NIH鼠檢測疫苗的ED50值為2.3μg/ml;經上海某公司DBA/1鼠檢測疫苗的ED50值為0.8μg/ml,對乙肝疫苗的效力反應最彊.根據<中國藥典>2005年版三部的規定,疫苗的ED50值為≤1.5μg/ml.所以得齣的結果 是2號種群NIH鼠和DBA/1鼠檢測疫苗是閤格的.基因檢測結果 DBA/1為H-2q近交繫小鼠,2號種群NIH鼠含有H-2q型基因的百分比是96%,3號種群NIH鼠含有H-2q型基因的百分比是30%,而1號種群NIH小鼠含有H-2q型基因百分比為56%,因此DBA/1小鼠和2號種群NIH鼠對乙肝疫苗均產生高應答效應,且遠遠高于免疫基因型為H-2d的BALB/c小鼠.結論 在進行乙肝疫苗效力鑒定時選擇含有q型基因較多的NIH小鼠作為檢測動物可以取得較好的應答效果.
목적 연구실험소서기인형여을간역묘면역응답적관계.이보증근거소서기인형선택괄우진행면역응답검측적실험소서,보증진행역묘면역응답검측시적규범화화표준화.방법 응용소서NIH1、2、3개충군화BALB/c、DBA/1공3충불동품계화동일품계불동충군적소서각40지,을간역묘희석4개불동적희석도,매개희석도주사동물10지.매표법검측을간역묘면역효력,측정을간역묘적반수유효제량(ED50)치,재통과미량세포독법화PCR방법 검측소서적H-2단배형,계산불동품계소서H-2q적백분비,득출을간역묘여불동동물충군적상관성.결과 중조을간역묘(양주효모)경BALB/c서검측역묘적ED50치위2.5μg/ml;경1호충군NIH서검측역묘적ED50치위2.0μg/ml;경2호충군NIH서검측역묘적EDM50치위1.3μg/ml;경3호충군NIH서검측역묘적ED50치위2.3μg/ml;경상해모공사DBA/1서검측역묘적ED50치위0.8μg/ml,대을간역묘적효력반응최강.근거<중국약전>2005년판삼부적규정,역묘적ED50치위≤1.5μg/ml.소이득출적결과 시2호충군NIH서화DBA/1서검측역묘시합격적.기인검측결과 DBA/1위H-2q근교계소서,2호충군NIH서함유H-2q형기인적백분비시96%,3호충군NIH서함유H-2q형기인적백분비시30%,이1호충군NIH소서함유H-2q형기인백분비위56%,인차DBA/1소서화2호충군NIH서대을간역묘균산생고응답효응,차원원고우면역기인형위H-2d적BALB/c소서.결론 재진행을간역묘효력감정시선택함유q형기인교다적NIH소서작위검측동물가이취득교호적응답효과.
Objective To test the potency of hepatitis B vaccine in China. Methods Two inbred strains(DBA/1 and BALB/c) and two NIH closes-colonies of mice were typed in the H-2 region by microcy-totoxicity method and PCR. Groups of mice of the tested strains were immunized with the same hepatitis B vaccine, the titre of anti-HBsAg antibody was analyzed by microplate, and the ED50 was then estimated by Karder method for each strain. Results Significant differences were found between potency estimates de-rived from assays using different strains of mice. Conclusion It is likely that the variation of immune re-sponse to hepatitis B vaccine in mice is correlative with the H-2 haplotype. In some special case, the bet-erozygosity in H-2 region found in NIH stock could influence the accuracy in such testing even a reference preparation of hepatitis B vaccine was used. Base on our experiment, to select an appropriate NIH stocks with the H-2q haplotype for potency testing of hepatitis B vaccine in China.
