免疫学杂志
免疫學雜誌
면역학잡지
IMMUNOLOGICAL JOURNAL
2005年
1期
33-36
,共4页
刘焰%刘君炎%马立新%居巍%彭剑虹%刘汉燕
劉燄%劉君炎%馬立新%居巍%彭劍虹%劉漢燕
류염%류군염%마립신%거외%팽검홍%류한연
结核杆菌%Ag85B%ESAT-6%双顺反子
結覈桿菌%Ag85B%ESAT-6%雙順反子
결핵간균%Ag85B%ESAT-6%쌍순반자
目的构建结核杆菌Ag85B与ESAT-6双顺反子真核表达质粒.方法采用PCR的方法从结核杆菌H37Rv基因组DNA中扩增出Ag85B及ESAT-6基因,将其分别定向克隆入真核双表达载体pIRES,构建同时表达两个目的基因的双顺反子重组质粒.进行酶切分析及序列测定后,用脂质体包裹体外转染A549细胞,RT-PCR检测Ag85B及ESAT-6的表达.结果核酸序列测定证实重组质粒构建正确;该重组质粒能在体外表达Ag85B及ESAT-6 mRNA.结论成功构建了结核杆菌Ag85B及ESAT-6双顺反子真核表达质粒,并在体外实现了共表达,为进一步在整体动物水平的实验研究奠定了基础.
目的構建結覈桿菌Ag85B與ESAT-6雙順反子真覈錶達質粒.方法採用PCR的方法從結覈桿菌H37Rv基因組DNA中擴增齣Ag85B及ESAT-6基因,將其分彆定嚮剋隆入真覈雙錶達載體pIRES,構建同時錶達兩箇目的基因的雙順反子重組質粒.進行酶切分析及序列測定後,用脂質體包裹體外轉染A549細胞,RT-PCR檢測Ag85B及ESAT-6的錶達.結果覈痠序列測定證實重組質粒構建正確;該重組質粒能在體外錶達Ag85B及ESAT-6 mRNA.結論成功構建瞭結覈桿菌Ag85B及ESAT-6雙順反子真覈錶達質粒,併在體外實現瞭共錶達,為進一步在整體動物水平的實驗研究奠定瞭基礎.
목적구건결핵간균Ag85B여ESAT-6쌍순반자진핵표체질립.방법채용PCR적방법종결핵간균H37Rv기인조DNA중확증출Ag85B급ESAT-6기인,장기분별정향극륭입진핵쌍표체재체pIRES,구건동시표체량개목적기인적쌍순반자중조질립.진행매절분석급서렬측정후,용지질체포과체외전염A549세포,RT-PCR검측Ag85B급ESAT-6적표체.결과핵산서렬측정증실중조질립구건정학;해중조질립능재체외표체Ag85B급ESAT-6 mRNA.결론성공구건료결핵간균Ag85B급ESAT-6쌍순반자진핵표체질립,병재체외실현료공표체,위진일보재정체동물수평적실험연구전정료기출.
