第四军医大学学报
第四軍醫大學學報
제사군의대학학보
JOURNAL OF THE FOURTH MILITARY MEDICAL UNIVERSITY
2006年
8期
720-722
,共3页
许朱定%宋振顺%安家泽%李韧%张福琴%窦科峰
許硃定%宋振順%安傢澤%李韌%張福琴%竇科峰
허주정%송진순%안가택%리인%장복금%두과봉
基因表达%高转移肝癌细胞MHCC97%逆转录聚合酶链反应%人皮层肌动蛋白cortactin
基因錶達%高轉移肝癌細胞MHCC97%逆轉錄聚閤酶鏈反應%人皮層肌動蛋白cortactin
기인표체%고전이간암세포MHCC97%역전록취합매련반응%인피층기동단백cortactin
目的:构建一个包含人皮层肌动蛋白(cortactin)反义基因的全部功能区的重组真核表达载体pcDNA3.0/cortactin,为进一步研究人皮层肌动蛋白对人肝癌细胞的转移影响的研究奠定基础. 方法: Trizol试剂法提取体外培养的人肝癌高转移细胞株MHCC97总RNA,经逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)扩增目的片段,PCR产物及真核表达载体分别双酶切后进行连接,并转化入大肠杆菌Ecoli.Dh5α扩增以获得重组载体. 结果: RT-PCR获得预期大小的特异性DNA片段,经PCR、双酶切鉴定及测序证实已将人皮层肌动蛋白基因cDNA片段正确的反向插入真核表达载体中. 结论: 成功获得反义pcDNA3.0/cortactin重组质粒.
目的:構建一箇包含人皮層肌動蛋白(cortactin)反義基因的全部功能區的重組真覈錶達載體pcDNA3.0/cortactin,為進一步研究人皮層肌動蛋白對人肝癌細胞的轉移影響的研究奠定基礎. 方法: Trizol試劑法提取體外培養的人肝癌高轉移細胞株MHCC97總RNA,經逆轉錄聚閤酶鏈式反應(RT-PCR)擴增目的片段,PCR產物及真覈錶達載體分彆雙酶切後進行連接,併轉化入大腸桿菌Ecoli.Dh5α擴增以穫得重組載體. 結果: RT-PCR穫得預期大小的特異性DNA片段,經PCR、雙酶切鑒定及測序證實已將人皮層肌動蛋白基因cDNA片段正確的反嚮插入真覈錶達載體中. 結論: 成功穫得反義pcDNA3.0/cortactin重組質粒.
목적:구건일개포함인피층기동단백(cortactin)반의기인적전부공능구적중조진핵표체재체pcDNA3.0/cortactin,위진일보연구인피층기동단백대인간암세포적전이영향적연구전정기출. 방법: Trizol시제법제취체외배양적인간암고전이세포주MHCC97총RNA,경역전록취합매련식반응(RT-PCR)확증목적편단,PCR산물급진핵표체재체분별쌍매절후진행련접,병전화입대장간균Ecoli.Dh5α확증이획득중조재체. 결과: RT-PCR획득예기대소적특이성DNA편단,경PCR、쌍매절감정급측서증실이장인피층기동단백기인cDNA편단정학적반향삽입진핵표체재체중. 결론: 성공획득반의pcDNA3.0/cortactin중조질립.
