中国临床神经科学
中國臨床神經科學
중국림상신경과학
CHINESE JOURNAL OF CLINICAL NEUROSCIENCES
2007年
4期
410-415
,共6页
吴晓牧%杨志刚%丁伟荣%杨海军%柳喆%张昆南
吳曉牧%楊誌剛%丁偉榮%楊海軍%柳喆%張昆南
오효목%양지강%정위영%양해군%류철%장곤남
骨髓间充质干细胞%神经元样细胞%诱导%分化
骨髓間充質榦細胞%神經元樣細胞%誘導%分化
골수간충질간세포%신경원양세포%유도%분화
目的:探索成人骨髓间充质干细胞(MSCs)的分离培养及诱导分化为神经元样细胞的体外条件.方法:采用Ficoll淋巴细胞分离液(1.077 g.mL-1)密度梯度离心法从人的骨髓中分离出MSCs进行体外扩增.收集第2代细胞流式细胞仪检测MSCs表面标志.逐渐加入表皮生长因子(EGF)、巯基乙醇(BME)和全反式维甲酸(ATRA)诱导MSCs向神经元细胞分化,通过免疫细胞化学法鉴定诱导后细胞神经元烯醇化酶(NSE)、神经巢蛋白(nsetin)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达情况.结果:流式细胞仪检测结果显示培养后的MSCs强表达CD29;较强表达CD44、CD166和CD105;不表达CD45、CD34和 HLA-DR.诱导剂诱导后,MSCs分化为具有典型的神经元形态的细胞,免疫细胞化学显示78%的细胞NSE表达阳性;大约51%细胞nsetin表达阳性;所有细胞GFAP均阴性表达.结论:成人MSCs在体外可定向诱导分化为神经元样细胞,且具有较高的阳性分化率.
目的:探索成人骨髓間充質榦細胞(MSCs)的分離培養及誘導分化為神經元樣細胞的體外條件.方法:採用Ficoll淋巴細胞分離液(1.077 g.mL-1)密度梯度離心法從人的骨髓中分離齣MSCs進行體外擴增.收集第2代細胞流式細胞儀檢測MSCs錶麵標誌.逐漸加入錶皮生長因子(EGF)、巰基乙醇(BME)和全反式維甲痠(ATRA)誘導MSCs嚮神經元細胞分化,通過免疫細胞化學法鑒定誘導後細胞神經元烯醇化酶(NSE)、神經巢蛋白(nsetin)、膠質纖維痠性蛋白(GFAP)的錶達情況.結果:流式細胞儀檢測結果顯示培養後的MSCs彊錶達CD29;較彊錶達CD44、CD166和CD105;不錶達CD45、CD34和 HLA-DR.誘導劑誘導後,MSCs分化為具有典型的神經元形態的細胞,免疫細胞化學顯示78%的細胞NSE錶達暘性;大約51%細胞nsetin錶達暘性;所有細胞GFAP均陰性錶達.結論:成人MSCs在體外可定嚮誘導分化為神經元樣細胞,且具有較高的暘性分化率.
목적:탐색성인골수간충질간세포(MSCs)적분리배양급유도분화위신경원양세포적체외조건.방법:채용Ficoll림파세포분리액(1.077 g.mL-1)밀도제도리심법종인적골수중분리출MSCs진행체외확증.수집제2대세포류식세포의검측MSCs표면표지.축점가입표피생장인자(EGF)、구기을순(BME)화전반식유갑산(ATRA)유도MSCs향신경원세포분화,통과면역세포화학법감정유도후세포신경원희순화매(NSE)、신경소단백(nsetin)、효질섬유산성단백(GFAP)적표체정황.결과:류식세포의검측결과현시배양후적MSCs강표체CD29;교강표체CD44、CD166화CD105;불표체CD45、CD34화 HLA-DR.유도제유도후,MSCs분화위구유전형적신경원형태적세포,면역세포화학현시78%적세포NSE표체양성;대약51%세포nsetin표체양성;소유세포GFAP균음성표체.결론:성인MSCs재체외가정향유도분화위신경원양세포,차구유교고적양성분화솔.
