微生物学通报
微生物學通報
미생물학통보
MICROBIOLOGY
2008年
4期
507-511
,共5页
张敏%江正强%唐荦%丛倩千%李里特
張敏%江正彊%唐犖%叢倩韆%李裏特
장민%강정강%당락%총천천%리리특
海栖热袍菌%β-半乳糖苷酶%克隆%表达%高温
海棲熱袍菌%β-半乳糖苷酶%剋隆%錶達%高溫
해서열포균%β-반유당감매%극륭%표체%고온
本文主要研究了在大肠杆菌中克隆和表达海栖热袍菌(Thermotoga maritima)MSB8的一个β-半乳糖苷酶基因 (TM_0310).以海栖热袍菌基因组 DNA(GenBank登录号 AE000512)为模板,设计特异性引物带有 NcoI-HindⅢ酶切位点,克隆得到的该基因全序列为2019 bp,编码672个氨基酸,分子量为78.972 kD.该基因编码的蛋白质属于42族,根据氨基酸同源性分析,该β-半乳糖苷酶与 Thermotoga petrophila RKU-1 来源的假想的β-半乳糖苷酶(GenBank 登录号 ABQ46628.1)以及Thermotoga sp.RQ2来源的β-半乳糖苷酶(GenBank 登录号 EDQ29256.1)同源性最高,均为95%.重组转化子经诱导酶比活可达2.08 U/mg 蛋白.粗酶液经过80℃热处理10 min,酶活残留70%以上,表明该酶有很好的耐热性,在高温工业环境中有良好应用前景.
本文主要研究瞭在大腸桿菌中剋隆和錶達海棲熱袍菌(Thermotoga maritima)MSB8的一箇β-半乳糖苷酶基因 (TM_0310).以海棲熱袍菌基因組 DNA(GenBank登錄號 AE000512)為模闆,設計特異性引物帶有 NcoI-HindⅢ酶切位點,剋隆得到的該基因全序列為2019 bp,編碼672箇氨基痠,分子量為78.972 kD.該基因編碼的蛋白質屬于42族,根據氨基痠同源性分析,該β-半乳糖苷酶與 Thermotoga petrophila RKU-1 來源的假想的β-半乳糖苷酶(GenBank 登錄號 ABQ46628.1)以及Thermotoga sp.RQ2來源的β-半乳糖苷酶(GenBank 登錄號 EDQ29256.1)同源性最高,均為95%.重組轉化子經誘導酶比活可達2.08 U/mg 蛋白.粗酶液經過80℃熱處理10 min,酶活殘留70%以上,錶明該酶有很好的耐熱性,在高溫工業環境中有良好應用前景.
본문주요연구료재대장간균중극륭화표체해서열포균(Thermotoga maritima)MSB8적일개β-반유당감매기인 (TM_0310).이해서열포균기인조 DNA(GenBank등록호 AE000512)위모판,설계특이성인물대유 NcoI-HindⅢ매절위점,극륭득도적해기인전서렬위2019 bp,편마672개안기산,분자량위78.972 kD.해기인편마적단백질속우42족,근거안기산동원성분석,해β-반유당감매여 Thermotoga petrophila RKU-1 래원적가상적β-반유당감매(GenBank 등록호 ABQ46628.1)이급Thermotoga sp.RQ2래원적β-반유당감매(GenBank 등록호 EDQ29256.1)동원성최고,균위95%.중조전화자경유도매비활가체2.08 U/mg 단백.조매액경과80℃열처리10 min,매활잔류70%이상,표명해매유흔호적내열성,재고온공업배경중유량호응용전경.
