CAJ | 학술논문

[目的]本研究通过选择对软骨细胞ECM合成具有促进作用的TGF-β1转染脂肪干细胞(ADSCs),观察转染后目的基因的稳定表达和对软骨细胞外基质(ECM)的两种重要组分:Ⅱ型胶原(type Ⅱ collage,ColⅡ)和aggrecan的合成,为构建新型的组织工程软骨提供实验依据.[方法]TGF-β1基因转染脂肪干细胞及阳性细胞克隆株的筛选;RT-PCR检测TGF-β1、纤连蛋白(fibronectin,FiN)、ColⅡ、Aggrecan的表达;Western-blot检测TGF-β1.[结果]RT-PCR结果显示:实验组(TGF-β1稳定转染组)的TGF-β1、FN、Col Ⅱ、Aggrecan的表达较空染组和正常对照组均明显增多(P＜0.01);Western blot检测实验组(TGF-β1稳定转染组)TGF-β1蛋白的表达较空染组和正常对照组均明显增多(P＜0.01).[结论]成功分离培养脂肪干细胞;以脂质体介导法将TGF-β1目的基因成功转染ADSCs,转染后成软骨分化的特异性细胞外基质增多,表明转染TGF-β1基因可以促使ADSCs向软骨细胞方向分化,从而为软骨组织工程提供新的思路和方法.
[목적]본연구통과선택대연골세포ECM합성구유촉진작용적TGF-β1전염지방간세포(ADSCs),관찰전염후목적기인적은정표체화대연골세포외기질(ECM)적량충중요조분:Ⅱ형효원(type Ⅱ collage,ColⅡ)화aggrecan적합성,위구건신형적조직공정연골제공실험의거.[방법]TGF-β1기인전염지방간세포급양성세포극륭주적사선;RT-PCR검측TGF-β1、섬련단백(fibronectin,FiN)、ColⅡ、Aggrecan적표체;Western-blot검측TGF-β1.[결과]RT-PCR결과현시:실험조(TGF-β1은정전염조)적TGF-β1、FN、Col Ⅱ、Aggrecan적표체교공염조화정상대조조균명현증다(P＜0.01);Western blot검측실험조(TGF-β1은정전염조)TGF-β1단백적표체교공염조화정상대조조균명현증다(P＜0.01).[결론]성공분리배양지방간세포;이지질체개도법장TGF-β1목적기인성공전염ADSCs,전염후성연골분화적특이성세포외기질증다,표명전염TGF-β1기인가이촉사ADSCs향연골세포방향분화,종이위연골조직공정제공신적사로화방법.