中国中西医结合杂志
中國中西醫結閤雜誌
중국중서의결합잡지
CHINESE JOURNAL OF INTEGRATED TRADITIONAL AND WESTERN MEDICINE
2008年
12期
1112-1117
,共6页
罗和古%陈家旭%岳广欣%丁杰%颜贤忠
囉和古%陳傢旭%嶽廣訢%丁傑%顏賢忠
라화고%진가욱%악엄흔%정걸%안현충
逍遥散%慢性束缚应激%代谢组学
逍遙散%慢性束縳應激%代謝組學
소요산%만성속박응격%대사조학
目的 通过检测慢性束缚应激大鼠血浆和逍遥散干预引起的大鼠内源性代谢物的变化,确定与之相关的"代谢组学特征"的小分子标志化合物,探讨慢性束缚应激大鼠代谢网路改变和逍遥散作用机制.方法 选用雄性SD大鼠36只,随机分为3组.即:正常对照组、模型组及逍遥散治疗组,其中每组又分为7、21天组,每组6只.以慢性束缚方法制作应激大鼠模型,每天束缚3 h.自造模第1天开始,逍遥散治疗组每日在束缚前1 h灌服逍遥散,给药量为3.854 g/kg,灌胃容积为1 mL/100 g体重.正常对照组、模型组灌服等体积的蒸馏水.分别于第8、22天采集血浆后取上清300 μL,在27℃的条件下,在Varian UNITYINO-VA 600MHz超导傅立叶变换核磁共振波谱仪上分别调用弛豫编辑脉冲序列(CPMG)、扩散编辑脉冲序列(LED),采用预饱和方式抑制水峰,自由感应衰减(FID)信号经过32k点傅立叶变换得到一维NMR谱图.以TSP为化学位移参考峰的位置,调用VNMR软件中的程序将<'1>H谱中从4.5～0.5 ppm(CPMG)以及6.0～0 ppm(LED)范围内的谱峰,按每段为0.04 ppm,进行分段积分.将积分数据归一化之后,将积分值进行中心化和定标,用SIMCA-P 10.0软件包进行主成分分析(PCA),必要时进行判别分析(PLS-DA).结果 (1)正常组与模型组之间代谢产物有明显的不同,两组比较,存在代谢网路的改变.模型组与治疗组各对照组间基本能分开,不同组别之间代谢产物存在差异、代谢网路有所不同,给予逍遥散后可以干预代谢物或代谢途径而致代谢终产物的改变.(2)慢性束缚应急大鼠血清中代谢产物乳酸(1.4、4.16)、胆碱(3.24)、N-乙酰半乳糖胺(NAC)、饱和脂肪酸(1-3)升高,而不饱和脂肪酸(1.99、4-5)、血糖(3-4)、HDL(0.83)等化合物含量降低.逍遥散可使乳酸、胆碱、NAC、饱和脂肪酸下降,血糖、不饱和脂肪酸、HDL、3.44 ppm等化合物含量升高,有明显的代谢终产物的调节效应.结论 慢性束缚应激大鼠代谢表型为乳酸、胆碱、NAC、饱和脂肪酸含量上升,血糖、不饱和脂肪酸、HDL、3.44 ppm等化合物含量降低.其代谢产物标志物可能是乳酸、胆碱、NAC、饱和脂肪酸、血糖、不饱和脂肪酸、HDL、3.44 ppm等化合物.慢性束缚应激发生的代谢终产物的改变以脂类物质更明显.逍遥散对代谢终产物有明显的调节效应,但主要干扰何种代谢物或代谢途径而改变代谢终产物还需进一步研究确认.
目的 通過檢測慢性束縳應激大鼠血漿和逍遙散榦預引起的大鼠內源性代謝物的變化,確定與之相關的"代謝組學特徵"的小分子標誌化閤物,探討慢性束縳應激大鼠代謝網路改變和逍遙散作用機製.方法 選用雄性SD大鼠36隻,隨機分為3組.即:正常對照組、模型組及逍遙散治療組,其中每組又分為7、21天組,每組6隻.以慢性束縳方法製作應激大鼠模型,每天束縳3 h.自造模第1天開始,逍遙散治療組每日在束縳前1 h灌服逍遙散,給藥量為3.854 g/kg,灌胃容積為1 mL/100 g體重.正常對照組、模型組灌服等體積的蒸餾水.分彆于第8、22天採集血漿後取上清300 μL,在27℃的條件下,在Varian UNITYINO-VA 600MHz超導傅立葉變換覈磁共振波譜儀上分彆調用弛豫編輯脈遲序列(CPMG)、擴散編輯脈遲序列(LED),採用預飽和方式抑製水峰,自由感應衰減(FID)信號經過32k點傅立葉變換得到一維NMR譜圖.以TSP為化學位移參攷峰的位置,調用VNMR軟件中的程序將<'1>H譜中從4.5～0.5 ppm(CPMG)以及6.0～0 ppm(LED)範圍內的譜峰,按每段為0.04 ppm,進行分段積分.將積分數據歸一化之後,將積分值進行中心化和定標,用SIMCA-P 10.0軟件包進行主成分分析(PCA),必要時進行判彆分析(PLS-DA).結果 (1)正常組與模型組之間代謝產物有明顯的不同,兩組比較,存在代謝網路的改變.模型組與治療組各對照組間基本能分開,不同組彆之間代謝產物存在差異、代謝網路有所不同,給予逍遙散後可以榦預代謝物或代謝途徑而緻代謝終產物的改變.(2)慢性束縳應急大鼠血清中代謝產物乳痠(1.4、4.16)、膽堿(3.24)、N-乙酰半乳糖胺(NAC)、飽和脂肪痠(1-3)升高,而不飽和脂肪痠(1.99、4-5)、血糖(3-4)、HDL(0.83)等化閤物含量降低.逍遙散可使乳痠、膽堿、NAC、飽和脂肪痠下降,血糖、不飽和脂肪痠、HDL、3.44 ppm等化閤物含量升高,有明顯的代謝終產物的調節效應.結論 慢性束縳應激大鼠代謝錶型為乳痠、膽堿、NAC、飽和脂肪痠含量上升,血糖、不飽和脂肪痠、HDL、3.44 ppm等化閤物含量降低.其代謝產物標誌物可能是乳痠、膽堿、NAC、飽和脂肪痠、血糖、不飽和脂肪痠、HDL、3.44 ppm等化閤物.慢性束縳應激髮生的代謝終產物的改變以脂類物質更明顯.逍遙散對代謝終產物有明顯的調節效應,但主要榦擾何種代謝物或代謝途徑而改變代謝終產物還需進一步研究確認.
목적 통과검측만성속박응격대서혈장화소요산간예인기적대서내원성대사물적변화,학정여지상관적"대사조학특정"적소분자표지화합물,탐토만성속박응격대서대사망로개변화소요산작용궤제.방법 선용웅성SD대서36지,수궤분위3조.즉:정상대조조、모형조급소요산치료조,기중매조우분위7、21천조,매조6지.이만성속박방법제작응격대서모형,매천속박3 h.자조모제1천개시,소요산치료조매일재속박전1 h관복소요산,급약량위3.854 g/kg,관위용적위1 mL/100 g체중.정상대조조、모형조관복등체적적증류수.분별우제8、22천채집혈장후취상청300 μL,재27℃적조건하,재Varian UNITYINO-VA 600MHz초도부립협변환핵자공진파보의상분별조용이예편집맥충서렬(CPMG)、확산편집맥충서렬(LED),채용예포화방식억제수봉,자유감응쇠감(FID)신호경과32k점부립협변환득도일유NMR보도.이TSP위화학위이삼고봉적위치,조용VNMR연건중적정서장<'1>H보중종4.5～0.5 ppm(CPMG)이급6.0～0 ppm(LED)범위내적보봉,안매단위0.04 ppm,진행분단적분.장적분수거귀일화지후,장적분치진행중심화화정표,용SIMCA-P 10.0연건포진행주성분분석(PCA),필요시진행판별분석(PLS-DA).결과 (1)정상조여모형조지간대사산물유명현적불동,량조비교,존재대사망로적개변.모형조여치료조각대조조간기본능분개,불동조별지간대사산물존재차이、대사망로유소불동,급여소요산후가이간예대사물혹대사도경이치대사종산물적개변.(2)만성속박응급대서혈청중대사산물유산(1.4、4.16)、담감(3.24)、N-을선반유당알(NAC)、포화지방산(1-3)승고,이불포화지방산(1.99、4-5)、혈당(3-4)、HDL(0.83)등화합물함량강저.소요산가사유산、담감、NAC、포화지방산하강,혈당、불포화지방산、HDL、3.44 ppm등화합물함량승고,유명현적대사종산물적조절효응.결론 만성속박응격대서대사표형위유산、담감、NAC、포화지방산함량상승,혈당、불포화지방산、HDL、3.44 ppm등화합물함량강저.기대사산물표지물가능시유산、담감、NAC、포화지방산、혈당、불포화지방산、HDL、3.44 ppm등화합물.만성속박응격발생적대사종산물적개변이지류물질경명현.소요산대대사종산물유명현적조절효응,단주요간우하충대사물혹대사도경이개변대사종산물환수진일보연구학인.
