中国药理学与毒理学杂志
中國藥理學與毒理學雜誌
중국약이학여독이학잡지
CHINESE JOURNAL OF PHARMACOLOGY AND TOXICOLOGY
2010年
3期
201-206
,共6页
邓有才%赛燕%董兆君%但国蓉
鄧有纔%賽燕%董兆君%但國蓉
산유재%새연%동조군%단국용
西罗莫司%鱼藤酮%自吞噬作用%细胞凋亡%胱天蛋白酶3%微管相关蛋白轻链3
西囉莫司%魚籐酮%自吞噬作用%細胞凋亡%胱天蛋白酶3%微管相關蛋白輕鏈3
서라막사%어등동%자탄서작용%세포조망%광천단백매3%미관상관단백경련3
目的 观察西罗莫司干预鱼藤酮诱导PC12细胞凋亡的作用,以探讨西罗莫司用于治疗帕金森病的可能性及机制.方法 PC12细胞处理分为正常对照组、鱼藤酮50 nmol·L-1组和西罗莫司25,50,100和200 μg·L-1组.PCI2细胞加入西罗莫司25,50,100和200 μg·L-1预处理12 h后,再加入鱼藤酮50nmol·L-1作用24 h.采用4',6-二脒-2-苯基吲哚(DAPI)免疫荧光实验检测细胞凋亡形态变化;Annexin V-FTTC/PI染色法检测细胞凋亡率;罗丹明123检测线粒体膜电位;吖啶橙荧光染色法检测自吞噬体形成;Westem印迹法检测胱天蛋白酶3和微管相关蛋白轻链3(LC3)表达.结果 与鱼藤酮模型组比较,西罗莫司50,100和200 μg·L-1组细胞凋亡率分别降低了20.6%,35.4%和40.2%(P<O.05,P<0.01);西罗莫司25,50,100和200 μg·L-1组可以升高鱼藤酮导致的线粒体膜电位降低,分别为1.8,2.2,2.4和3.2倍.西罗莫司100 μg·L-1预处理促使LC3由Ⅰ型向Ⅱ型转变,胱天蛋白酶3的20 ku活性片段降低16.2%.结论 西罗莫司通过增强失调线粒体的自吞噬降解作用,降低线粒体相关的促凋亡因子的释放和激活,进而抑制依赖胱天蛋白酶凋亡途径的激活而对鱼藤酮诱导的细胞凋亡具有保护作用,提示西罗莫司有治疗帕金森病的可能.
目的 觀察西囉莫司榦預魚籐酮誘導PC12細胞凋亡的作用,以探討西囉莫司用于治療帕金森病的可能性及機製.方法 PC12細胞處理分為正常對照組、魚籐酮50 nmol·L-1組和西囉莫司25,50,100和200 μg·L-1組.PCI2細胞加入西囉莫司25,50,100和200 μg·L-1預處理12 h後,再加入魚籐酮50nmol·L-1作用24 h.採用4',6-二脒-2-苯基吲哚(DAPI)免疫熒光實驗檢測細胞凋亡形態變化;Annexin V-FTTC/PI染色法檢測細胞凋亡率;囉丹明123檢測線粒體膜電位;吖啶橙熒光染色法檢測自吞噬體形成;Westem印跡法檢測胱天蛋白酶3和微管相關蛋白輕鏈3(LC3)錶達.結果 與魚籐酮模型組比較,西囉莫司50,100和200 μg·L-1組細胞凋亡率分彆降低瞭20.6%,35.4%和40.2%(P<O.05,P<0.01);西囉莫司25,50,100和200 μg·L-1組可以升高魚籐酮導緻的線粒體膜電位降低,分彆為1.8,2.2,2.4和3.2倍.西囉莫司100 μg·L-1預處理促使LC3由Ⅰ型嚮Ⅱ型轉變,胱天蛋白酶3的20 ku活性片段降低16.2%.結論 西囉莫司通過增彊失調線粒體的自吞噬降解作用,降低線粒體相關的促凋亡因子的釋放和激活,進而抑製依賴胱天蛋白酶凋亡途徑的激活而對魚籐酮誘導的細胞凋亡具有保護作用,提示西囉莫司有治療帕金森病的可能.
목적 관찰서라막사간예어등동유도PC12세포조망적작용,이탐토서라막사용우치료파금삼병적가능성급궤제.방법 PC12세포처리분위정상대조조、어등동50 nmol·L-1조화서라막사25,50,100화200 μg·L-1조.PCI2세포가입서라막사25,50,100화200 μg·L-1예처리12 h후,재가입어등동50nmol·L-1작용24 h.채용4',6-이미-2-분기신타(DAPI)면역형광실험검측세포조망형태변화;Annexin V-FTTC/PI염색법검측세포조망솔;라단명123검측선립체막전위;아정등형광염색법검측자탄서체형성;Westem인적법검측광천단백매3화미관상관단백경련3(LC3)표체.결과 여어등동모형조비교,서라막사50,100화200 μg·L-1조세포조망솔분별강저료20.6%,35.4%화40.2%(P<O.05,P<0.01);서라막사25,50,100화200 μg·L-1조가이승고어등동도치적선립체막전위강저,분별위1.8,2.2,2.4화3.2배.서라막사100 μg·L-1예처리촉사LC3유Ⅰ형향Ⅱ형전변,광천단백매3적20 ku활성편단강저16.2%.결론 서라막사통과증강실조선립체적자탄서강해작용,강저선립체상관적촉조망인자적석방화격활,진이억제의뢰광천단백매조망도경적격활이대어등동유도적세포조망구유보호작용,제시서라막사유치료파금삼병적가능.
