蚕业科学
蠶業科學
잠업과학
ACTA SERICOLOGICA SINICA
2010年
6期
1022-1027
,共6页
马向超%张爽%黄大庄%张静洁%王圣杰%夏明瑞
馬嚮超%張爽%黃大莊%張靜潔%王聖傑%夏明瑞
마향초%장상%황대장%장정길%왕골걸%하명서
桑天牛%遗传多样性%扩增片段长度多态性%反应体系
桑天牛%遺傳多樣性%擴增片段長度多態性%反應體繫
상천우%유전다양성%확증편단장도다태성%반응체계
建立适合的AFLP反应体系研究桑树主要害虫桑天牛(Apriona germari)的遗传多样性,有助于从分子水平分析桑天牛不同地理种群的遗传多样性以及开辟害虫防治新途径.对提取的桑天牛成虫基因组DNA预扩增中的Mg2+浓度、dNTP浓度、引物浓度、Taq DNA聚合酶的用量以及选择性扩增中的预扩增产物稀释倍数、dNTP浓度、引物浓度、Mg2+浓度和Taq酶的用量等进行单因素试验,优化反应体系.确定预扩增反应体系中的Mg2+终浓度为1.50 mmol/L,dNTP终浓度为0.15 mmol/L,引物浓度为10.0×10-7 mol/L,Taq酶用量为1.00 U;确定选择性扩增反应体系中的预扩增产物稀释倍数为40倍,dNTP终浓度为0.15 mmol/L,引物浓度为5.00×10-7 mol/L,Mg2+终浓度为1.50 mmol/L,Taq酶用量为1.00 U.用优化后的反应体系扩增得到了条带清晰的桑天牛AFLP图谱.
建立適閤的AFLP反應體繫研究桑樹主要害蟲桑天牛(Apriona germari)的遺傳多樣性,有助于從分子水平分析桑天牛不同地理種群的遺傳多樣性以及開闢害蟲防治新途徑.對提取的桑天牛成蟲基因組DNA預擴增中的Mg2+濃度、dNTP濃度、引物濃度、Taq DNA聚閤酶的用量以及選擇性擴增中的預擴增產物稀釋倍數、dNTP濃度、引物濃度、Mg2+濃度和Taq酶的用量等進行單因素試驗,優化反應體繫.確定預擴增反應體繫中的Mg2+終濃度為1.50 mmol/L,dNTP終濃度為0.15 mmol/L,引物濃度為10.0×10-7 mol/L,Taq酶用量為1.00 U;確定選擇性擴增反應體繫中的預擴增產物稀釋倍數為40倍,dNTP終濃度為0.15 mmol/L,引物濃度為5.00×10-7 mol/L,Mg2+終濃度為1.50 mmol/L,Taq酶用量為1.00 U.用優化後的反應體繫擴增得到瞭條帶清晰的桑天牛AFLP圖譜.
건립괄합적AFLP반응체계연구상수주요해충상천우(Apriona germari)적유전다양성,유조우종분자수평분석상천우불동지리충군적유전다양성이급개벽해충방치신도경.대제취적상천우성충기인조DNA예확증중적Mg2+농도、dNTP농도、인물농도、Taq DNA취합매적용량이급선택성확증중적예확증산물희석배수、dNTP농도、인물농도、Mg2+농도화Taq매적용량등진행단인소시험,우화반응체계.학정예확증반응체계중적Mg2+종농도위1.50 mmol/L,dNTP종농도위0.15 mmol/L,인물농도위10.0×10-7 mol/L,Taq매용량위1.00 U;학정선택성확증반응체계중적예확증산물희석배수위40배,dNTP종농도위0.15 mmol/L,인물농도위5.00×10-7 mol/L,Mg2+종농도위1.50 mmol/L,Taq매용량위1.00 U.용우화후적반응체계확증득도료조대청석적상천우AFLP도보.
