中国水产科学
中國水產科學
중국수산과학
Journal of Fishery Sciences of China
2011年
5期
1021-1031
,共11页
平海林%吴金英%徐胜威%胡开顺%段志刚
平海林%吳金英%徐勝威%鬍開順%段誌剛
평해림%오금영%서성위%호개순%단지강
TGF-β1%大海马%克隆%组织分布%重组蛋白%信号通路
TGF-β1%大海馬%剋隆%組織分佈%重組蛋白%信號通路
TGF-β1%대해마%극륭%조직분포%중조단백%신호통로
转化生长因子β1(Transforming growth factor-β1,TGF-β1)是一种多效应细胞因子,在免疫系统中,成熟的TGF-β1多肽是一种强有力的细胞分化调节剂和免疫调节剂.本研究通过基因克隆得到了大海马(Hippocampus kuda)TGF-β1 cDNA全长序列(GenBank登录号为HM564035),全长为1941 bp,开放阅读框为1 161 bp,编码1种含386个氨基酸的多肽.同源性分析表明,大海马TGF-β1与斜带石斑鱼TGF-β1的亲缘关系最近.Real-time PCR结果显示,TGF-β1基因在健康大海马肾中表达量最高,其次是肝、大脑、小脑、皮肤、中脑、卵巢,在鳃和肠道中表达很少,在心脏和肌肉中检测不到表达.大海马TGF-β1重组蛋白在TNT(R)快速偶联的转录/翻译系统中高效表达,用BS3交联后形成了大量的可溶性二聚体蛋白,Westem blot检测结果显示该重组蛋白具有良好的免疫学活性.利用得到的大海马rTGF-β1刺激HeLa细胞,结果显示刺激细胞中TGF-β1下游Smad信号通路中的Smad3、Smad4基因表达量上升,Smad7基因表达量下降,表明所得到的大海马TGF-β1重组蛋白具有特定的生物活性,能够诱导人细胞中Smad信号通路的活化,延续了TGF-β1蛋白功能的保守性.
轉化生長因子β1(Transforming growth factor-β1,TGF-β1)是一種多效應細胞因子,在免疫繫統中,成熟的TGF-β1多肽是一種彊有力的細胞分化調節劑和免疫調節劑.本研究通過基因剋隆得到瞭大海馬(Hippocampus kuda)TGF-β1 cDNA全長序列(GenBank登錄號為HM564035),全長為1941 bp,開放閱讀框為1 161 bp,編碼1種含386箇氨基痠的多肽.同源性分析錶明,大海馬TGF-β1與斜帶石斑魚TGF-β1的親緣關繫最近.Real-time PCR結果顯示,TGF-β1基因在健康大海馬腎中錶達量最高,其次是肝、大腦、小腦、皮膚、中腦、卵巢,在鰓和腸道中錶達很少,在心髒和肌肉中檢測不到錶達.大海馬TGF-β1重組蛋白在TNT(R)快速偶聯的轉錄/翻譯繫統中高效錶達,用BS3交聯後形成瞭大量的可溶性二聚體蛋白,Westem blot檢測結果顯示該重組蛋白具有良好的免疫學活性.利用得到的大海馬rTGF-β1刺激HeLa細胞,結果顯示刺激細胞中TGF-β1下遊Smad信號通路中的Smad3、Smad4基因錶達量上升,Smad7基因錶達量下降,錶明所得到的大海馬TGF-β1重組蛋白具有特定的生物活性,能夠誘導人細胞中Smad信號通路的活化,延續瞭TGF-β1蛋白功能的保守性.
전화생장인자β1(Transforming growth factor-β1,TGF-β1)시일충다효응세포인자,재면역계통중,성숙적TGF-β1다태시일충강유력적세포분화조절제화면역조절제.본연구통과기인극륭득도료대해마(Hippocampus kuda)TGF-β1 cDNA전장서렬(GenBank등록호위HM564035),전장위1941 bp,개방열독광위1 161 bp,편마1충함386개안기산적다태.동원성분석표명,대해마TGF-β1여사대석반어TGF-β1적친연관계최근.Real-time PCR결과현시,TGF-β1기인재건강대해마신중표체량최고,기차시간、대뇌、소뇌、피부、중뇌、란소,재새화장도중표체흔소,재심장화기육중검측불도표체.대해마TGF-β1중조단백재TNT(R)쾌속우련적전록/번역계통중고효표체,용BS3교련후형성료대량적가용성이취체단백,Westem blot검측결과현시해중조단백구유량호적면역학활성.이용득도적대해마rTGF-β1자격HeLa세포,결과현시자격세포중TGF-β1하유Smad신호통로중적Smad3、Smad4기인표체량상승,Smad7기인표체량하강,표명소득도적대해마TGF-β1중조단백구유특정적생물활성,능구유도인세포중Smad신호통로적활화,연속료TGF-β1단백공능적보수성.
