中华医学杂志
中華醫學雜誌
중화의학잡지
National Medical Journal of China
2002年
21期
1480-1483
,共4页
肝炎,乙型,慢性%干扰素γ,重组%肿瘤坏死因子
肝炎,乙型,慢性%榦擾素γ,重組%腫瘤壞死因子
간염,을형,만성%간우소γ,중조%종류배사인자
目的探讨IFN-γ和TNF-α对乙型肝炎病毒转录后调节机制的影响.方法在体外构建含有HPRE片段的pDM138质粒(含有CAT报告基因),应用脂质体介导方法转染HepG2细胞,观察细胞因子对重组质粒载体CAT报告基因活性表达的影响,CAT基因的活性的检测采用ELISA检测试剂盒.结果成功构建了含有HPRE片段的重组质粒载体.转染重组质粒的HepG2细胞CAT活性表达明显增强,而转染空载体的HepG2细胞仅有本底表达,分别为896.5±213.6 和36.7±11.3 pg/ml.IFN-γ和TNF-α对转染重组质粒的HepG2细胞CAT活性表达的影响均具有浓度依赖性,而对空载体CAT活性的表达无影响.转染重组质粒的HepG2细胞在未加入细胞因子时,其CAT表达活性为896.5±213.6 pg/ml;与IFN-γ、TNF-α及IFN-γ+TNF-α孵育后,其CAT表达活性分别为324.4±56.8, 395.8±82.3, 175.3±35.6 pg/ml,与未加入时比较, t=5.19,4.39,6.68,P<0.01,差异有显著性.结论 IFN-γ和TNF-α可能通过抑制HPRE的功能,调控乙型肝炎病毒基因的表达.
目的探討IFN-γ和TNF-α對乙型肝炎病毒轉錄後調節機製的影響.方法在體外構建含有HPRE片段的pDM138質粒(含有CAT報告基因),應用脂質體介導方法轉染HepG2細胞,觀察細胞因子對重組質粒載體CAT報告基因活性錶達的影響,CAT基因的活性的檢測採用ELISA檢測試劑盒.結果成功構建瞭含有HPRE片段的重組質粒載體.轉染重組質粒的HepG2細胞CAT活性錶達明顯增彊,而轉染空載體的HepG2細胞僅有本底錶達,分彆為896.5±213.6 和36.7±11.3 pg/ml.IFN-γ和TNF-α對轉染重組質粒的HepG2細胞CAT活性錶達的影響均具有濃度依賴性,而對空載體CAT活性的錶達無影響.轉染重組質粒的HepG2細胞在未加入細胞因子時,其CAT錶達活性為896.5±213.6 pg/ml;與IFN-γ、TNF-α及IFN-γ+TNF-α孵育後,其CAT錶達活性分彆為324.4±56.8, 395.8±82.3, 175.3±35.6 pg/ml,與未加入時比較, t=5.19,4.39,6.68,P<0.01,差異有顯著性.結論 IFN-γ和TNF-α可能通過抑製HPRE的功能,調控乙型肝炎病毒基因的錶達.
목적탐토IFN-γ화TNF-α대을형간염병독전록후조절궤제적영향.방법재체외구건함유HPRE편단적pDM138질립(함유CAT보고기인),응용지질체개도방법전염HepG2세포,관찰세포인자대중조질립재체CAT보고기인활성표체적영향,CAT기인적활성적검측채용ELISA검측시제합.결과성공구건료함유HPRE편단적중조질립재체.전염중조질립적HepG2세포CAT활성표체명현증강,이전염공재체적HepG2세포부유본저표체,분별위896.5±213.6 화36.7±11.3 pg/ml.IFN-γ화TNF-α대전염중조질립적HepG2세포CAT활성표체적영향균구유농도의뢰성,이대공재체CAT활성적표체무영향.전염중조질립적HepG2세포재미가입세포인자시,기CAT표체활성위896.5±213.6 pg/ml;여IFN-γ、TNF-α급IFN-γ+TNF-α부육후,기CAT표체활성분별위324.4±56.8, 395.8±82.3, 175.3±35.6 pg/ml,여미가입시비교, t=5.19,4.39,6.68,P<0.01,차이유현저성.결론 IFN-γ화TNF-α가능통과억제HPRE적공능,조공을형간염병독기인적표체.
