中国脑血管病杂志
中國腦血管病雜誌
중국뇌혈관병잡지
CHINESE JOURNAL OF CEREBROVASCULAR DISEASES
2012年
8期
418-422,427
,共6页
荔志云%张明%季玮%周杰%田立桩%赵红斌%孙建军%李长栋
荔誌雲%張明%季瑋%週傑%田立樁%趙紅斌%孫建軍%李長棟
려지운%장명%계위%주걸%전립장%조홍빈%손건군%리장동
缺氧%肾上腺髓质%嗜铬细胞瘤%大黄酚%体外研究%大鼠%神经细胞保护药
缺氧%腎上腺髓質%嗜鉻細胞瘤%大黃酚%體外研究%大鼠%神經細胞保護藥
결양%신상선수질%기락세포류%대황분%체외연구%대서%신경세포보호약
目的 观察大黄酚对缺氧引起的大鼠肾上腺髓质嗜铬细胞瘤分化株(PC12)细胞损伤的保护作用. 方法 培养PC12细胞,采用自制的密闭三气培养箱建立缺氧所致的PC12细胞损伤模型,根据不同条件,分为对照组、模型组、大黄酚组(包括1μg/ml组和5μg/ml组).于缺氧处理前及处理后1、2、6、12、24h,每个时间点取6个复孔.采用四甲基偶氮唑盐法(MTT)检测PC 12细胞增殖活性,高倍显微镜下观察PC 12细胞核形态,测定各组上清液中超氧化物歧化酶(SOD)含量,免疫组化法测定各组线虫抗凋亡基因的人类同源基因表达蛋白(BCL-2)的表达,实时定量PCR测定p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)和含半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase-3)mRNA的表达. 结果 ①缺氧处理后12h,MTT法测定大黄酚1 μg/ml组的细胞活力高于模型组；缺氧处理24 h,大黄酚1μg/ml组和5 μg/ml组的细胞活力均高于模型组,差异均有统计学意义(P＜0.05).②从缺氧处理后1h开始,大黄酚1 μg/ml组和5μg/ml组的SOD值高于模型组,差异有统计学意义(P＜0.05).③从缺氧后2h开始,大黄酚1μg/ml组和5μg/ml的BCL-2阳性率均高于模型组.④从缺氧处理2h开始,模型组p38MAPK mRNA表达量高于大黄酚1μg/ml组和5μg/ml组,差异有统计学意义(P＜0.05).从缺氧处理6h开始,模型组Caspase-3mRNA表达量高于大黄酚1μg/ml组和5μg/ml组,差异有统计学意义(P＜0.05).⑤缺氧处理后12、24 h,模型组细胞的细胞核皱缩、形态不清,内见颗粒样物质形成增多；大黄酚组的细胞核形态较清楚,少见颗粒样物质形成. 结论 大黄酚可以减轻缺氧所致PC12细胞的损伤,对PC12细胞有保护作用.
目的 觀察大黃酚對缺氧引起的大鼠腎上腺髓質嗜鉻細胞瘤分化株(PC12)細胞損傷的保護作用. 方法 培養PC12細胞,採用自製的密閉三氣培養箱建立缺氧所緻的PC12細胞損傷模型,根據不同條件,分為對照組、模型組、大黃酚組(包括1μg/ml組和5μg/ml組).于缺氧處理前及處理後1、2、6、12、24h,每箇時間點取6箇複孔.採用四甲基偶氮唑鹽法(MTT)檢測PC 12細胞增殖活性,高倍顯微鏡下觀察PC 12細胞覈形態,測定各組上清液中超氧化物歧化酶(SOD)含量,免疫組化法測定各組線蟲抗凋亡基因的人類同源基因錶達蛋白(BCL-2)的錶達,實時定量PCR測定p38絲裂原活化蛋白激酶(MAPK)和含半胱氨痠天鼕氨痠蛋白酶3(Caspase-3)mRNA的錶達. 結果 ①缺氧處理後12h,MTT法測定大黃酚1 μg/ml組的細胞活力高于模型組；缺氧處理24 h,大黃酚1μg/ml組和5 μg/ml組的細胞活力均高于模型組,差異均有統計學意義(P＜0.05).②從缺氧處理後1h開始,大黃酚1 μg/ml組和5μg/ml組的SOD值高于模型組,差異有統計學意義(P＜0.05).③從缺氧後2h開始,大黃酚1μg/ml組和5μg/ml的BCL-2暘性率均高于模型組.④從缺氧處理2h開始,模型組p38MAPK mRNA錶達量高于大黃酚1μg/ml組和5μg/ml組,差異有統計學意義(P＜0.05).從缺氧處理6h開始,模型組Caspase-3mRNA錶達量高于大黃酚1μg/ml組和5μg/ml組,差異有統計學意義(P＜0.05).⑤缺氧處理後12、24 h,模型組細胞的細胞覈皺縮、形態不清,內見顆粒樣物質形成增多；大黃酚組的細胞覈形態較清楚,少見顆粒樣物質形成. 結論 大黃酚可以減輕缺氧所緻PC12細胞的損傷,對PC12細胞有保護作用.
목적 관찰대황분대결양인기적대서신상선수질기락세포류분화주(PC12)세포손상적보호작용. 방법 배양PC12세포,채용자제적밀폐삼기배양상건립결양소치적PC12세포손상모형,근거불동조건,분위대조조、모형조、대황분조(포괄1μg/ml조화5μg/ml조).우결양처리전급처리후1、2、6、12、24h,매개시간점취6개복공.채용사갑기우담서염법(MTT)검측PC 12세포증식활성,고배현미경하관찰PC 12세포핵형태,측정각조상청액중초양화물기화매(SOD)함량,면역조화법측정각조선충항조망기인적인류동원기인표체단백(BCL-2)적표체,실시정량PCR측정p38사렬원활화단백격매(MAPK)화함반광안산천동안산단백매3(Caspase-3)mRNA적표체. 결과 ①결양처리후12h,MTT법측정대황분1 μg/ml조적세포활력고우모형조；결양처리24 h,대황분1μg/ml조화5 μg/ml조적세포활력균고우모형조,차이균유통계학의의(P＜0.05).②종결양처리후1h개시,대황분1 μg/ml조화5μg/ml조적SOD치고우모형조,차이유통계학의의(P＜0.05).③종결양후2h개시,대황분1μg/ml조화5μg/ml적BCL-2양성솔균고우모형조.④종결양처리2h개시,모형조p38MAPK mRNA표체량고우대황분1μg/ml조화5μg/ml조,차이유통계학의의(P＜0.05).종결양처리6h개시,모형조Caspase-3mRNA표체량고우대황분1μg/ml조화5μg/ml조,차이유통계학의의(P＜0.05).⑤결양처리후12、24 h,모형조세포적세포핵추축、형태불청,내견과립양물질형성증다；대황분조적세포핵형태교청초,소견과립양물질형성. 결론 대황분가이감경결양소치PC12세포적손상,대PC12세포유보호작용.
