CAJ | 학술논문

目的对重组人血清白蛋白/粒细胞刺激因子融合蛋白(rHSA/GCSF)开展药效学、药理学和毒理学动物评价研究,以确认其安全性和有效性.方法 ①对 rHSA/GCSF 开展的药效学研究内容主要有:以恒河猴骨髓细胞为研究系统,在体外条件下培养骨髓粒细胞-巨噬细胞集落(CFU-GM),计数不同浓度的 rHSA/GCSF对 CFU-GM 数的影响的体外药效学评价;以小鼠 60Coγ照射、氟尿嘧啶注射液所致的鼠白细胞低下和对 60Coγ射线照射致食蟹猴白细胞低下的治疗作用.②药理学研究观察了 rHSA/GCSF 对小鼠中枢神经系统和狗呼吸及心血管系统功能的影响.③毒理学研究考察了 rHSA/GCSF 静脉和皮下给予小鼠、食蟹猴的急性毒性反应,以及长期和反复给药对大鼠和食蟹猴的安全性做出评价.④ rHSA/GCSF 的药代/毒代试验则是对 125I-rHSA/GCSF 不同剂量单次皮下注射给予小鼠、大鼠后,rHSA/GCSF 在各器官的分布、总放射性和 TCA 沉淀放射性的动力学参数测定,以及对不同剂量 rHSA/GCSF 连续给药食蟹猴后的血浆药物浓度及代谢动力学参数开展了考察.结果 ① rHSA/GCSF 可以使骨髓的粒白细胞系(粒系)增生活跃,骨髓粒系造血细胞及成熟中性粒细胞均明显增多;对氟尿嘧啶所致小鼠白细胞减少症有明显的治疗作用,在使用化疗药早期,可以减缓白细胞的降低,特别是可以使粒白细胞提前恢复到正常水平;rHSA/GCSF 可显著缩短食蟹猴白细胞减少症放疗模型产生的白细胞低下持续时间,使外周血白细胞加速恢复,尤其以中性粒细胞的增加为主,同时对红细胞和血小板的影响不大.②从获得的 PD/PK 数据t1/2 来看:rHSA/GCSF 半衰期平均值约为 38.6 h;单次皮下注射 rHSA/GCSF,在 500、1500、3000 μg/kg 剂量范围内对小鼠中枢神经系统无影响,与戊巴比妥钠无协同作用;单次皮下注射 rHSA/GCSF 在 50、200 μg/kg 剂量范围内对狗呼吸和心血管系统无明显影响.实验表明 rHSA/GCSF单次皮下和静脉注射给予小鼠的最大耐受量(MTD)≥37.5 mg/kg,单次皮下注射给予食蟹猴的最大耐受剂量为 11.6 mg/kg;长期反复给药对大鼠的基本安全剂量为300 μg/kg,对食蟹猴则是≥ 150 μg/kg.结论 rHSA/GCSF 融合蛋白每 4 天给药 1 次,对放、化疗所致的动物外周血白细胞减少症具有治疗作用,与市售常规 rhGCSF 每天注射 1 次相比具有长效作用.所获得的大量药效学、药代动力学、毒理学、毒代动力学的试验数据可供正在开展的临床试验研究参考,并具有很好的指导意义. 目的對重組人血清白蛋白/粒細胞刺激因子融閤蛋白(rHSA/GCSF)開展藥效學、藥理學和毒理學動物評價研究,以確認其安全性和有效性.方法 ①對 rHSA/GCSF 開展的藥效學研究內容主要有:以恆河猴骨髓細胞為研究繫統,在體外條件下培養骨髓粒細胞-巨噬細胞集落(CFU-GM),計數不同濃度的 rHSA/GCSF對 CFU-GM 數的影響的體外藥效學評價;以小鼠 60Coγ照射、氟尿嘧啶註射液所緻的鼠白細胞低下和對 60Coγ射線照射緻食蟹猴白細胞低下的治療作用.②藥理學研究觀察瞭 rHSA/GCSF 對小鼠中樞神經繫統和狗呼吸及心血管繫統功能的影響.③毒理學研究攷察瞭 rHSA/GCSF 靜脈和皮下給予小鼠、食蟹猴的急性毒性反應,以及長期和反複給藥對大鼠和食蟹猴的安全性做齣評價.④ rHSA/GCSF 的藥代/毒代試驗則是對 125I-rHSA/GCSF 不同劑量單次皮下註射給予小鼠、大鼠後,rHSA/GCSF 在各器官的分佈、總放射性和 TCA 沉澱放射性的動力學參數測定,以及對不同劑量 rHSA/GCSF 連續給藥食蟹猴後的血漿藥物濃度及代謝動力學參數開展瞭攷察.結果 ① rHSA/GCSF 可以使骨髓的粒白細胞繫(粒繫)增生活躍,骨髓粒繫造血細胞及成熟中性粒細胞均明顯增多;對氟尿嘧啶所緻小鼠白細胞減少癥有明顯的治療作用,在使用化療藥早期,可以減緩白細胞的降低,特彆是可以使粒白細胞提前恢複到正常水平;rHSA/GCSF 可顯著縮短食蟹猴白細胞減少癥放療模型產生的白細胞低下持續時間,使外週血白細胞加速恢複,尤其以中性粒細胞的增加為主,同時對紅細胞和血小闆的影響不大.②從穫得的 PD/PK 數據t1/2 來看:rHSA/GCSF 半衰期平均值約為 38.6 h;單次皮下註射 rHSA/GCSF,在 500、1500、3000 μg/kg 劑量範圍內對小鼠中樞神經繫統無影響,與戊巴比妥鈉無協同作用;單次皮下註射 rHSA/GCSF 在 50、200 μg/kg 劑量範圍內對狗呼吸和心血管繫統無明顯影響.實驗錶明 rHSA/GCSF單次皮下和靜脈註射給予小鼠的最大耐受量(MTD)≥37.5 mg/kg,單次皮下註射給予食蟹猴的最大耐受劑量為 11.6 mg/kg;長期反複給藥對大鼠的基本安全劑量為300 μg/kg,對食蟹猴則是≥ 150 μg/kg.結論 rHSA/GCSF 融閤蛋白每 4 天給藥 1 次,對放、化療所緻的動物外週血白細胞減少癥具有治療作用,與市售常規 rhGCSF 每天註射 1 次相比具有長效作用.所穫得的大量藥效學、藥代動力學、毒理學、毒代動力學的試驗數據可供正在開展的臨床試驗研究參攷,併具有很好的指導意義.
목적 대중조인혈청백단백/립세포자격인자융합단백(rHSA/GCSF)개전약효학、약이학화독이학동물평개연구,이학인기안전성화유효성.방법 ①대 rHSA/GCSF 개전적약효학연구내용주요유:이항하후골수세포위연구계통,재체외조건하배양골수립세포-거서세포집락(CFU-GM),계수불동농도적 rHSA/GCSF대 CFU-GM 수적영향적체외약효학평개;이소서 60Coγ조사、불뇨밀정주사액소치적서백세포저하화대 60Coγ사선조사치식해후백세포저하적치료작용.②약이학연구관찰료 rHSA/GCSF 대소서중추신경계통화구호흡급심혈관계통공능적영향.③독이학연구고찰료 rHSA/GCSF 정맥화피하급여소서、식해후적급성독성반응,이급장기화반복급약대대서화식해후적안전성주출평개.④ rHSA/GCSF 적약대/독대시험칙시대 125I-rHSA/GCSF 불동제량단차피하주사급여소서、대서후,rHSA/GCSF 재각기관적분포、총방사성화 TCA 침정방사성적동역학삼수측정,이급대불동제량 rHSA/GCSF 련속급약식해후후적혈장약물농도급대사동역학삼수개전료고찰.결과 ① rHSA/GCSF 가이사골수적립백세포계(립계)증생활약,골수립계조혈세포급성숙중성립세포균명현증다;대불뇨밀정소치소서백세포감소증유명현적치료작용,재사용화료약조기,가이감완백세포적강저,특별시가이사립백세포제전회복도정상수평;rHSA/GCSF 가현저축단식해후백세포감소증방료모형산생적백세포저하지속시간,사외주혈백세포가속회복,우기이중성립세포적증가위주,동시대홍세포화혈소판적영향불대.②종획득적 PD/PK 수거t1/2 래간:rHSA/GCSF 반쇠기평균치약위 38.6 h;단차피하주사 rHSA/GCSF,재 500、1500、3000 μg/kg 제량범위내대소서중추신경계통무영향,여무파비타납무협동작용;단차피하주사 rHSA/GCSF 재 50、200 μg/kg 제량범위내대구호흡화심혈관계통무명현영향.실험표명 rHSA/GCSF단차피하화정맥주사급여소서적최대내수량(MTD)≥37.5 mg/kg,단차피하주사급여식해후적최대내수제량위 11.6 mg/kg;장기반복급약대대서적기본안전제량위300 μg/kg,대식해후칙시≥ 150 μg/kg.결론 rHSA/GCSF 융합단백매 4 천급약 1 차,대방、화료소치적동물외주혈백세포감소증구유치료작용,여시수상규 rhGCSF 매천주사 1 차상비구유장효작용.소획득적대량약효학、약대동역학、독이학、독대동역학적시험수거가공정재개전적림상시험연구삼고,병구유흔호적지도의의.