CAJ | 학술논문

本研究确认HLA新等位基因HLA-B*3936并分析其序列.先证者为脐血造血干细胞捐献者,样本DNA抽提采用PEL-FREEZ抽提试剂盒,利用单链特异性引物PCR方法扩增先证者HLA-B基因的第2-4外显子,对PCR产物直接进行第2、3、4外显予双向测序分析.结果显示:先证者样本中存在2个HLA-B等位基因,其中1个等位基因为HLA-B*4002,另1个经Blast验证确定为新的等位基因,新的等位基因序列已递交GenBank(DQ242650,DQ242651,DQ242652).与最接近的B*3901等位基因比较,新的等位基因在第3外显子上有4个核苷酸的差异,其中第527位T→A、第538位C→T、第539位T→G、第544位A→G,这引起氨基酸第152位缬氨酸(Val)→谷氨酸(Glu)、第156位异亮氨酸(Ⅱe)→色氨酸(Trp)、第158位苏氨酸(Thr)→丙氨酸(Ala).实验结果提示该等位基因为新的HLA-B等位基因,已被世界卫生组织HLA因子命名委员会正式命名为HLA-B*3936.
본연구학인HLA신등위기인HLA-B*3936병분석기서렬.선증자위제혈조혈간세포연헌자,양본DNA추제채용PEL-FREEZ추제시제합,이용단련특이성인물PCR방법확증선증자HLA-B기인적제2-4외현자,대PCR산물직접진행제2、3、4외현여쌍향측서분석.결과현시:선증자양본중존재2개HLA-B등위기인,기중1개등위기인위HLA-B*4002,령1개경Blast험증학정위신적등위기인,신적등위기인서렬이체교GenBank(DQ242650,DQ242651,DQ242652).여최접근적B*3901등위기인비교,신적등위기인재제3외현자상유4개핵감산적차이,기중제527위T→A、제538위C→T、제539위T→G、제544위A→G,저인기안기산제152위힐안산(Val)→곡안산(Glu)、제156위이량안산(Ⅱe)→색안산(Trp)、제158위소안산(Thr)→병안산(Ala).실험결과제시해등위기인위신적HLA-B등위기인,이피세계위생조직HLA인자명명위원회정식명명위HLA-B*3936.