中国生物化学与分子生物学报
中國生物化學與分子生物學報
중국생물화학여분자생물학보
CHINESE JOURNAL OF BIOCHEMISTRY AND MOLECULAR BIOLOGY
2008年
1期
35-39
,共5页
王元忠%李渝萍%陈敏%陈彬%陈健%周度金
王元忠%李渝萍%陳敏%陳彬%陳健%週度金
왕원충%리투평%진민%진빈%진건%주도금
富含脯氨酸核受体辅调节蛋白1%核定位信号序列%辅活化子%绿色荧光蛋白
富含脯氨痠覈受體輔調節蛋白1%覈定位信號序列%輔活化子%綠色熒光蛋白
부함포안산핵수체보조절단백1%핵정위신호서렬%보활화자%록색형광단백
为鉴定富含脯氨酸核受体辅调节蛋白1(PNRC1)分子的核定位信号序列(nuclear localization signal sequence,NLS),在生物信息学方法预测的基础上,先构建野生型PNRC1及删除预测NLS的PNRC1突变体的绿色荧光蛋白(GFP)重组表达载体,转染细胞后通过激光共聚焦显微镜观察PNRC1分子在删除预测NLS后细胞内的定位变化.然后,将预测的NLS编码序列直接连到GFP表达载体上,以及将预测的NLS加到胞浆蛋白上构建其GFP重组表达载体,转染细胞,观察预测的NLS能否把构建的重组体都带到细胞核内.结果显示,删除PNRC1中预测的NLS后,其定位从细胞核中变为主要定位在细胞浆中,而预测的NLS能把GFP或胞浆中的蛋白带到细胞核中.研究表明,预测的NLS为PNRC1分子真正的NLS.
為鑒定富含脯氨痠覈受體輔調節蛋白1(PNRC1)分子的覈定位信號序列(nuclear localization signal sequence,NLS),在生物信息學方法預測的基礎上,先構建野生型PNRC1及刪除預測NLS的PNRC1突變體的綠色熒光蛋白(GFP)重組錶達載體,轉染細胞後通過激光共聚焦顯微鏡觀察PNRC1分子在刪除預測NLS後細胞內的定位變化.然後,將預測的NLS編碼序列直接連到GFP錶達載體上,以及將預測的NLS加到胞漿蛋白上構建其GFP重組錶達載體,轉染細胞,觀察預測的NLS能否把構建的重組體都帶到細胞覈內.結果顯示,刪除PNRC1中預測的NLS後,其定位從細胞覈中變為主要定位在細胞漿中,而預測的NLS能把GFP或胞漿中的蛋白帶到細胞覈中.研究錶明,預測的NLS為PNRC1分子真正的NLS.
위감정부함포안산핵수체보조절단백1(PNRC1)분자적핵정위신호서렬(nuclear localization signal sequence,NLS),재생물신식학방법예측적기출상,선구건야생형PNRC1급산제예측NLS적PNRC1돌변체적록색형광단백(GFP)중조표체재체,전염세포후통과격광공취초현미경관찰PNRC1분자재산제예측NLS후세포내적정위변화.연후,장예측적NLS편마서렬직접련도GFP표체재체상,이급장예측적NLS가도포장단백상구건기GFP중조표체재체,전염세포,관찰예측적NLS능부파구건적중조체도대도세포핵내.결과현시,산제PNRC1중예측적NLS후,기정위종세포핵중변위주요정위재세포장중,이예측적NLS능파GFP혹포장중적단백대도세포핵중.연구표명,예측적NLS위PNRC1분자진정적NLS.
