环境科学与技术
環境科學與技術
배경과학여기술
ENVIRONMENTAL SCIENCE & TECHNOLOGY
2011年
2期
107-110
,共4页
王娜%刘庆%邢鹏%余多慰%吴庆龙
王娜%劉慶%邢鵬%餘多慰%吳慶龍
왕나%류경%형붕%여다위%오경룡
军团菌%巢式PCR-MPN法%湖泊
軍糰菌%巢式PCR-MPN法%湖泊
군단균%소식PCR-MPN법%호박
为了直接检测环境水体中军团菌的存在,文章将巢式PCR与倍比稀释法相结合(巢式PCR-MPN法),采用两对引物扩增环境样品基因组DNA.将检测到含有军团菌的样品DNA模板进行十倍梯度稀释,由最低检测的稀释度,计算出样品中军团菌的细胞数,同时确定方法检测的灵敏度.并用克隆建库、构建系统树的方法来验证该文研究方法的特异性.研究结果表明,巢式PCR第二步后获得的序列均为军团菌序列,该方法军团菌DNA的检出限可以低至2.74 fg/μL.该研究建立的水体军团菌检测方法具有简便快捷、特异性好、灵敏度高的特点.
為瞭直接檢測環境水體中軍糰菌的存在,文章將巢式PCR與倍比稀釋法相結閤(巢式PCR-MPN法),採用兩對引物擴增環境樣品基因組DNA.將檢測到含有軍糰菌的樣品DNA模闆進行十倍梯度稀釋,由最低檢測的稀釋度,計算齣樣品中軍糰菌的細胞數,同時確定方法檢測的靈敏度.併用剋隆建庫、構建繫統樹的方法來驗證該文研究方法的特異性.研究結果錶明,巢式PCR第二步後穫得的序列均為軍糰菌序列,該方法軍糰菌DNA的檢齣限可以低至2.74 fg/μL.該研究建立的水體軍糰菌檢測方法具有簡便快捷、特異性好、靈敏度高的特點.
위료직접검측배경수체중군단균적존재,문장장소식PCR여배비희석법상결합(소식PCR-MPN법),채용량대인물확증배경양품기인조DNA.장검측도함유군단균적양품DNA모판진행십배제도희석,유최저검측적희석도,계산출양품중군단균적세포수,동시학정방법검측적령민도.병용극륭건고、구건계통수적방법래험증해문연구방법적특이성.연구결과표명,소식PCR제이보후획득적서렬균위군단균서렬,해방법군단균DNA적검출한가이저지2.74 fg/μL.해연구건립적수체군단균검측방법구유간편쾌첩、특이성호、령민도고적특점.
