CAJ | 학술논문

目的:观察新型组蛋白去乙酰化酶( Histone Deacetylases,HDACs)抑制剂DWP0016对神经胶质瘤U251细胞株的作用,探讨诱导U251细胞周期阻滞及凋亡作用的机制.方法:采用噻唑蓝(MTT)法检测DWP0016对U251细胞株的增殖抑制作用；采用流式细胞术观察DWP0016对U251细胞周期的影响及凋亡诱导作用；采用实时定量PCR(real-time PCR)检测抑癌因子P21,P53的mRNA水平变化；蛋白免疫印迹法(Western blotting)测定Ac-H3,P21,P53,Pi3K,p-Pi3K,Akt,p-Akt的蛋白表达并进行光密度定量.结果:DWP0016抑制U251细胞增殖的半数抑制浓度(IC50=0.531 μmol·L-1)明显低于阳性对照奥沙利铂(IC50=4.792 μmol·L-1),组蛋白H3乙酰化水平显著上升；DWP0016作用后,U251细胞中细胞周期阻滞于G1期并产生凋亡,P21,P53的mRNA水平和蛋白水平明显上升,Pi3K/Akt通路中的Pi3K,Akt的磷酸化水平下降.结论:DWP0016能明显抑制U251细胞增殖,诱导细胞周期阻滞和凋亡产生,其机制与促进抑癌因子P21,P53的转录及蛋白表达,抑制细胞中Pi3K/Akt生长信号通路有关,具有良好的抗神经胶质瘤潜力和开发应用前景.
목적:관찰신형조단백거을선화매( Histone Deacetylases,HDACs)억제제DWP0016대신경효질류U251세포주적작용,탐토유도U251세포주기조체급조망작용적궤제.방법:채용새서람(MTT)법검측DWP0016대U251세포주적증식억제작용；채용류식세포술관찰DWP0016대U251세포주기적영향급조망유도작용；채용실시정량PCR(real-time PCR)검측억암인자P21,P53적mRNA수평변화；단백면역인적법(Western blotting)측정Ac-H3,P21,P53,Pi3K,p-Pi3K,Akt,p-Akt적단백표체병진행광밀도정량.결과:DWP0016억제U251세포증식적반수억제농도(IC50=0.531 μmol·L-1)명현저우양성대조오사리박(IC50=4.792 μmol·L-1),조단백H3을선화수평현저상승；DWP0016작용후,U251세포중세포주기조체우G1기병산생조망,P21,P53적mRNA수평화단백수평명현상승,Pi3K/Akt통로중적Pi3K,Akt적린산화수평하강.결론:DWP0016능명현억제U251세포증식,유도세포주기조체화조망산생,기궤제여촉진억암인자P21,P53적전록급단백표체,억제세포중Pi3K/Akt생장신호통로유관,구유량호적항신경효질류잠력화개발응용전경.