中国实验动物学报
中國實驗動物學報
중국실험동물학보
ACTA LABORATORIUM ANIMALIS SCIENTIA SINICA
2007年
5期
321-325
,共5页
杨国柱%陈系古%黄冰%单于%肖东%马芸%邓新燕
楊國柱%陳繫古%黃冰%單于%肖東%馬蕓%鄧新燕
양국주%진계고%황빙%단우%초동%마예%산신연
载脂蛋白%四环素调控反式激活子%四环素反应元件%丙肝病毒核心蛋白%转基因鼠
載脂蛋白%四環素調控反式激活子%四環素反應元件%丙肝病毒覈心蛋白%轉基因鼠
재지단백%사배소조공반식격활자%사배소반응원건%병간병독핵심단백%전기인서
目的 为了丰富现有的四环素调控系统的小鼠资源库,同时也为更好地研究目的基因HCV-C的作用机制提供一个活体的动物模型,制备基于四环素调控系统原理的调控部分ApoE-rtTA的转基因小鼠,与反应部分TRE-HCV-C转基因小鼠,相互交配制作出双转基因小鼠.方法 应用显微注射法将构建好的两种基因片段ApoE-rtTA及TRE-HCV-C分别注入超排的昆明母鼠的受精卵, 再植入假母输卵管,出生动物及其后代经PCR初步筛选出阳性,将两者及阳性后代交配产生携带5只转基因鼠再经Western blot和RT-PCR在RNA和蛋白水平上进一步鉴定.结果 产生了3只整合有ApoE-rtTA基因的首见鼠和125只阳性子代,以及产生了5只整合有TRE-HCV-C基因的首见鼠和16只阳性子代.PCR及Southern Blot证实上述阳性鼠确有转基因整合.将两者交配产生携带5只双转基因鼠.结论 成功制备了携带有ApoE-rtTA及TRE-HCV-C转基因小鼠,建立了分别携带有这两种基因的鼠群,以及同时携带有两种基因的双转基因小鼠,为四环素调控系统提供了一个良好的通用型的调控动物模型,同时也可利用四环素调控系统来研究HCV中的C基因对小鼠的作用,也是HCV-C基因功能研究及与肝细胞癌的关系的机制研究的一个有用工具.
目的 為瞭豐富現有的四環素調控繫統的小鼠資源庫,同時也為更好地研究目的基因HCV-C的作用機製提供一箇活體的動物模型,製備基于四環素調控繫統原理的調控部分ApoE-rtTA的轉基因小鼠,與反應部分TRE-HCV-C轉基因小鼠,相互交配製作齣雙轉基因小鼠.方法 應用顯微註射法將構建好的兩種基因片段ApoE-rtTA及TRE-HCV-C分彆註入超排的昆明母鼠的受精卵, 再植入假母輸卵管,齣生動物及其後代經PCR初步篩選齣暘性,將兩者及暘性後代交配產生攜帶5隻轉基因鼠再經Western blot和RT-PCR在RNA和蛋白水平上進一步鑒定.結果 產生瞭3隻整閤有ApoE-rtTA基因的首見鼠和125隻暘性子代,以及產生瞭5隻整閤有TRE-HCV-C基因的首見鼠和16隻暘性子代.PCR及Southern Blot證實上述暘性鼠確有轉基因整閤.將兩者交配產生攜帶5隻雙轉基因鼠.結論 成功製備瞭攜帶有ApoE-rtTA及TRE-HCV-C轉基因小鼠,建立瞭分彆攜帶有這兩種基因的鼠群,以及同時攜帶有兩種基因的雙轉基因小鼠,為四環素調控繫統提供瞭一箇良好的通用型的調控動物模型,同時也可利用四環素調控繫統來研究HCV中的C基因對小鼠的作用,也是HCV-C基因功能研究及與肝細胞癌的關繫的機製研究的一箇有用工具.
목적 위료봉부현유적사배소조공계통적소서자원고,동시야위경호지연구목적기인HCV-C적작용궤제제공일개활체적동물모형,제비기우사배소조공계통원리적조공부분ApoE-rtTA적전기인소서,여반응부분TRE-HCV-C전기인소서,상호교배제작출쌍전기인소서.방법 응용현미주사법장구건호적량충기인편단ApoE-rtTA급TRE-HCV-C분별주입초배적곤명모서적수정란, 재식입가모수란관,출생동물급기후대경PCR초보사선출양성,장량자급양성후대교배산생휴대5지전기인서재경Western blot화RT-PCR재RNA화단백수평상진일보감정.결과 산생료3지정합유ApoE-rtTA기인적수견서화125지양성자대,이급산생료5지정합유TRE-HCV-C기인적수견서화16지양성자대.PCR급Southern Blot증실상술양성서학유전기인정합.장량자교배산생휴대5지쌍전기인서.결론 성공제비료휴대유ApoE-rtTA급TRE-HCV-C전기인소서,건립료분별휴대유저량충기인적서군,이급동시휴대유량충기인적쌍전기인소서,위사배소조공계통제공료일개량호적통용형적조공동물모형,동시야가이용사배소조공계통래연구HCV중적C기인대소서적작용,야시HCV-C기인공능연구급여간세포암적관계적궤제연구적일개유용공구.
