新疆农业大学学报
新疆農業大學學報
신강농업대학학보
JOURNAL OF XINJIANG AGRICULTURAL UNIVERSITY
2007年
4期
63-67
,共5页
翁琴%陈全家%孔庆平%张国政%武金玲%曲延英
翁琴%陳全傢%孔慶平%張國政%武金玲%麯延英
옹금%진전가%공경평%장국정%무금령%곡연영
海岛棉茎尖%遗传转化%根癌农杆菌%BT基因
海島棉莖尖%遺傳轉化%根癌農桿菌%BT基因
해도면경첨%유전전화%근암농간균%BT기인
采用根癌农杆菌LBA4404和 EHA105介导,对海岛棉的茎尖再生体系及其转化影响因子进行了研究.茎尖培养与棉花体细胞胚胎发生相比,不同基因型的茎尖再生频率差异不明显;在9种不同的激素组合中,以6-BA0.5 mg/L+NAA0.1 mg/L与1/2MSB5+IBA 0.1 mg/L对茎尖的再生效果较好;获得较高转化频率的海岛棉培养条件为:海岛苗茎尖在OD600值为0.6～0.8农杆菌菌液中感染20～30 min,共培养3 d后进行转接,在含有不同激素和抗生素的各类培养基中进行抑菌和筛选继代培养,选择压以50～150 mg/L梯度进行;农杆菌以EHA105菌株的转化效果较好;抗性苗用SDS-CTAB法提取其总DNA,进行PCR扩增检测,有7株PCR检测呈阳性反应.由此,初步证明外源抗虫基因已经进入到再生植株的细胞核中.
採用根癌農桿菌LBA4404和 EHA105介導,對海島棉的莖尖再生體繫及其轉化影響因子進行瞭研究.莖尖培養與棉花體細胞胚胎髮生相比,不同基因型的莖尖再生頻率差異不明顯;在9種不同的激素組閤中,以6-BA0.5 mg/L+NAA0.1 mg/L與1/2MSB5+IBA 0.1 mg/L對莖尖的再生效果較好;穫得較高轉化頻率的海島棉培養條件為:海島苗莖尖在OD600值為0.6～0.8農桿菌菌液中感染20～30 min,共培養3 d後進行轉接,在含有不同激素和抗生素的各類培養基中進行抑菌和篩選繼代培養,選擇壓以50～150 mg/L梯度進行;農桿菌以EHA105菌株的轉化效果較好;抗性苗用SDS-CTAB法提取其總DNA,進行PCR擴增檢測,有7株PCR檢測呈暘性反應.由此,初步證明外源抗蟲基因已經進入到再生植株的細胞覈中.
채용근암농간균LBA4404화 EHA105개도,대해도면적경첨재생체계급기전화영향인자진행료연구.경첨배양여면화체세포배태발생상비,불동기인형적경첨재생빈솔차이불명현;재9충불동적격소조합중,이6-BA0.5 mg/L+NAA0.1 mg/L여1/2MSB5+IBA 0.1 mg/L대경첨적재생효과교호;획득교고전화빈솔적해도면배양조건위:해도묘경첨재OD600치위0.6～0.8농간균균액중감염20～30 min,공배양3 d후진행전접,재함유불동격소화항생소적각류배양기중진행억균화사선계대배양,선택압이50～150 mg/L제도진행;농간균이EHA105균주적전화효과교호;항성묘용SDS-CTAB법제취기총DNA,진행PCR확증검측,유7주PCR검측정양성반응.유차,초보증명외원항충기인이경진입도재생식주적세포핵중.
