基因组学与应用生物学
基因組學與應用生物學
기인조학여응용생물학
GENOMICS AND APPLIED BIOLOGY
2009年
2期
237-244
,共8页
谢纯政%梁炫强%李玲%刘海燕
謝純政%樑炫彊%李玲%劉海燕
사순정%량현강%리령%류해연
花生%黄曲霉%ARAhPR10基因%原核表达
花生%黃麯黴%ARAhPR10基因%原覈錶達
화생%황곡매%ARAhPR10기인%원핵표체
花生黄曲霉污染已成为制约我国花生及花生制品出口贸易的关键因素.基于花生抗黄曲霉相关EST序列,RT-PCR法克隆花生ARAhPR10基因(gb|EU661964.1),开放读码框471 bp,编码157个氨基酸,分子量16.9 kD,等电点5.03.与已报导AhPR10(gb|AY726607)相似性为49.3%.推导氨基酸序列含有PR10家族的高度保守"P-loop"基序(G*GG*G)和Betv1保守疏水结构域"GVALP PTAEK ITFET KLVEG PNGGSIGKLT LKY",推测ARAhPR10是该花生PR10家族的新成员.其基因组扩增序列长度561 bp,两个外显子间存在一个长度为87 bp的内含子.原核表达ARAhPR10的融合蛋白约25 kD,Ni+-NTA树脂亲和纯化后获得电泳单一条带.纯化的ARAhPR10融合蛋白具有体外核酸酶活性,预测其具有抗黄曲霉活性.该基因的克隆及其原核表达融合蛋白的获取为ARAhPR10功能研究奠定了基础.
花生黃麯黴汙染已成為製約我國花生及花生製品齣口貿易的關鍵因素.基于花生抗黃麯黴相關EST序列,RT-PCR法剋隆花生ARAhPR10基因(gb|EU661964.1),開放讀碼框471 bp,編碼157箇氨基痠,分子量16.9 kD,等電點5.03.與已報導AhPR10(gb|AY726607)相似性為49.3%.推導氨基痠序列含有PR10傢族的高度保守"P-loop"基序(G*GG*G)和Betv1保守疏水結構域"GVALP PTAEK ITFET KLVEG PNGGSIGKLT LKY",推測ARAhPR10是該花生PR10傢族的新成員.其基因組擴增序列長度561 bp,兩箇外顯子間存在一箇長度為87 bp的內含子.原覈錶達ARAhPR10的融閤蛋白約25 kD,Ni+-NTA樹脂親和純化後穫得電泳單一條帶.純化的ARAhPR10融閤蛋白具有體外覈痠酶活性,預測其具有抗黃麯黴活性.該基因的剋隆及其原覈錶達融閤蛋白的穫取為ARAhPR10功能研究奠定瞭基礎.
화생황곡매오염이성위제약아국화생급화생제품출구무역적관건인소.기우화생항황곡매상관EST서렬,RT-PCR법극륭화생ARAhPR10기인(gb|EU661964.1),개방독마광471 bp,편마157개안기산,분자량16.9 kD,등전점5.03.여이보도AhPR10(gb|AY726607)상사성위49.3%.추도안기산서렬함유PR10가족적고도보수"P-loop"기서(G*GG*G)화Betv1보수소수결구역"GVALP PTAEK ITFET KLVEG PNGGSIGKLT LKY",추측ARAhPR10시해화생PR10가족적신성원.기기인조확증서렬장도561 bp,량개외현자간존재일개장도위87 bp적내함자.원핵표체ARAhPR10적융합단백약25 kD,Ni+-NTA수지친화순화후획득전영단일조대.순화적ARAhPR10융합단백구유체외핵산매활성,예측기구유항황곡매활성.해기인적극륭급기원핵표체융합단백적획취위ARAhPR10공능연구전정료기출.
