CAJ | 학술논문

目的:体外动态观察ConA激活的调节性T细胞表面趋化因子受体的表达变化及其趋化特性,为利用调节性T细胞诱导免疫耐受提供线索.方法:①流式细胞仪分选出CD4hiCDl27loCD25hi-int细胞.②纯化的调节性T细胞与CD4+CIY25-T细胞分别用ConA(10μg/ml)刺激0、24和48小时后,用趋化因子CCLI、CCL5、CCL20、CCL22做趋化实验,观察各趋化因子作用下调节性T细胞与CD4+CD25-T细胞的趋化特性.同时,流式细胞仪检测CCR4与CCR6的表达.结果:①分离得到的调节性T细胞纯度为97.4%,活细胞率为95%,得率:4.1%.②CCL1、CCL20、CCL22均可趋化调节性T细胞,且在ConA激活后趋化效率随时间而改变.CCL1与CCL22对调节性T细胞的趋化指数显著高于CD4+CIY25-T细胞;CCL20对调节性T细胞和CD4+CD25-T细胞趋化指数都很高;CCL5对调节性T细胞趋化性则显著弱于CD4+CD25-T细胞.③ConA刺激后,调节性T细胞趋化因子受体CCR4、CCR6的表达均明显高于对照组细胞(CD4+CD25-细胞).随着ConA刺激时间延长,两组细胞CCR4的表达均持续增强;两组细胞CCR6的表达均在刺激24小时后表达明显增强,48小时后CCR6的表达略有减弱,呈下降趋势.结论:①磁珠阴性分选结合流式细胞仪技术可分选出较高纯度及活率的调节性T细胞.②调节性T细胞与CD4+CD25-T细胞相比,二者具有不同的趋化特性.CCL1对调节性T细胞的趋化作用较特异,CCL22趋化作用较强,CCI_5趋化作用较弱.而CCL20对CD4+CD25-T细胞和调节性T细胞趋化作用都强.③ConA刺激后48小时内趋化因子CCL1、CCL20、CCL22对调节性T细胞的趋化作用随刺激时间而增强.④conA刺激可以增强受体CCR4、CCR6表达.⑤提示趋化因子受体的表达与细胞活化状态有关,且不同受体表达变化趋势不同.
목적:체외동태관찰ConA격활적조절성T세포표면추화인자수체적표체변화급기추화특성,위이용조절성T세포유도면역내수제공선색.방법:①류식세포의분선출CD4hiCDl27loCD25hi-int세포.②순화적조절성T세포여CD4+CIY25-T세포분별용ConA(10μg/ml)자격0、24화48소시후,용추화인자CCLI、CCL5、CCL20、CCL22주추화실험,관찰각추화인자작용하조절성T세포여CD4+CD25-T세포적추화특성.동시,류식세포의검측CCR4여CCR6적표체.결과:①분리득도적조절성T세포순도위97.4%,활세포솔위95%,득솔:4.1%.②CCL1、CCL20、CCL22균가추화조절성T세포,차재ConA격활후추화효솔수시간이개변.CCL1여CCL22대조절성T세포적추화지수현저고우CD4+CIY25-T세포;CCL20대조절성T세포화CD4+CD25-T세포추화지수도흔고;CCL5대조절성T세포추화성칙현저약우CD4+CD25-T세포.③ConA자격후,조절성T세포추화인자수체CCR4、CCR6적표체균명현고우대조조세포(CD4+CD25-세포).수착ConA자격시간연장,량조세포CCR4적표체균지속증강;량조세포CCR6적표체균재자격24소시후표체명현증강,48소시후CCR6적표체략유감약,정하강추세.결론:①자주음성분선결합류식세포의기술가분선출교고순도급활솔적조절성T세포.②조절성T세포여CD4+CD25-T세포상비,이자구유불동적추화특성.CCL1대조절성T세포적추화작용교특이,CCL22추화작용교강,CCI_5추화작용교약.이CCL20대CD4+CD25-T세포화조절성T세포추화작용도강.③ConA자격후48소시내추화인자CCL1、CCL20、CCL22대조절성T세포적추화작용수자격시간이증강.④conA자격가이증강수체CCR4、CCR6표체.⑤제시추화인자수체적표체여세포활화상태유관,차불동수체표체변화추세불동.