细胞与分子免疫学杂志
細胞與分子免疫學雜誌
세포여분자면역학잡지
2008年
1期
72-75
,共4页
李丽%池沛冬%孟锐%杨滨燕%吴长有
李麗%池沛鼕%孟銳%楊濱燕%吳長有
리려%지패동%맹예%양빈연%오장유
BrdU%增殖%流式细胞仪%细胞活化
BrdU%增殖%流式細胞儀%細胞活化
BrdU%증식%류식세포의%세포활화
目的:探讨利用流式细胞术(FCM)检测细胞增殖(BrdU掺入)与T细胞的活化及细胞因子表达的关系.方法:正常人PBMC经PMA+Ionomycin刺激不同时间,在培养结束前1 h加入BrdU,利用抗BrdU以及多种抗细胞表面和抗细胞因子抗体标记,FCM检测.结果:体外刺激PBMC 48 h后,可见T细胞有BrdU掺入,但随着时间的延长,掺入率没有明显增加.对比分析BrdU掺入与活化分子表达的关系表明,CD69在刺激后8 h达高峰,而CD25则需要24 h后达到高峰.另外,BrdU掺入与细胞因子表达没有明显关系,当PBMC刺激后8 h,即有大量IFN-γ的表达,而当培养时间延长到24、48和72 h后,IFN-γ的表达没有明显改变.OKT3+antiCD28刺激T细胞后BrdU的阳性率高于PMA+Ionomycin刺激的T细胞,CD8+T细胞掺入率高于CD4+T细胞.结论:利用FCM检测BrdU+细胞可以用于评价T细胞的增殖反应,但在多克隆刺激的条件下,只有少数细胞发生增殖,并且BrdU掺入率受刺激剂种类和时间的影响,BrdU掺入与活化分子和细胞因子的表达均没有明显关系.
目的:探討利用流式細胞術(FCM)檢測細胞增殖(BrdU摻入)與T細胞的活化及細胞因子錶達的關繫.方法:正常人PBMC經PMA+Ionomycin刺激不同時間,在培養結束前1 h加入BrdU,利用抗BrdU以及多種抗細胞錶麵和抗細胞因子抗體標記,FCM檢測.結果:體外刺激PBMC 48 h後,可見T細胞有BrdU摻入,但隨著時間的延長,摻入率沒有明顯增加.對比分析BrdU摻入與活化分子錶達的關繫錶明,CD69在刺激後8 h達高峰,而CD25則需要24 h後達到高峰.另外,BrdU摻入與細胞因子錶達沒有明顯關繫,噹PBMC刺激後8 h,即有大量IFN-γ的錶達,而噹培養時間延長到24、48和72 h後,IFN-γ的錶達沒有明顯改變.OKT3+antiCD28刺激T細胞後BrdU的暘性率高于PMA+Ionomycin刺激的T細胞,CD8+T細胞摻入率高于CD4+T細胞.結論:利用FCM檢測BrdU+細胞可以用于評價T細胞的增殖反應,但在多剋隆刺激的條件下,隻有少數細胞髮生增殖,併且BrdU摻入率受刺激劑種類和時間的影響,BrdU摻入與活化分子和細胞因子的錶達均沒有明顯關繫.
목적:탐토이용류식세포술(FCM)검측세포증식(BrdU참입)여T세포적활화급세포인자표체적관계.방법:정상인PBMC경PMA+Ionomycin자격불동시간,재배양결속전1 h가입BrdU,이용항BrdU이급다충항세포표면화항세포인자항체표기,FCM검측.결과:체외자격PBMC 48 h후,가견T세포유BrdU참입,단수착시간적연장,참입솔몰유명현증가.대비분석BrdU참입여활화분자표체적관계표명,CD69재자격후8 h체고봉,이CD25칙수요24 h후체도고봉.령외,BrdU참입여세포인자표체몰유명현관계,당PBMC자격후8 h,즉유대량IFN-γ적표체,이당배양시간연장도24、48화72 h후,IFN-γ적표체몰유명현개변.OKT3+antiCD28자격T세포후BrdU적양성솔고우PMA+Ionomycin자격적T세포,CD8+T세포참입솔고우CD4+T세포.결론:이용FCM검측BrdU+세포가이용우평개T세포적증식반응,단재다극륭자격적조건하,지유소수세포발생증식,병차BrdU참입솔수자격제충류화시간적영향,BrdU참입여활화분자화세포인자적표체균몰유명현관계.
