鼠肝质膜蛋白质组研究的方法评估
서간질막단백질조연구적방법평고
  • 万方数据
    中国科学C辑 중국과학C집
    SCIENCE IN CHINA (SERIES C)
    2007年 6期 601-608 ,共8页

    陈平%张丽军%李选文%王细娥%曹锐%刘珍%熊继先%彭霞%魏颖娟%银兴峰%王贤纯%梁宋平

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    肝%细胞质膜%蛋白质组%质谱%2DE%鸟枪法%1DE 肝%細胞質膜%蛋白質組%質譜%2DE%鳥鎗法%1DE
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    细胞质膜是细胞中重要的细胞器,在肝功能的发挥中具有非常重要的作用.使用蔗糖密度梯度离心纯化细胞质膜,通过电子显微镜观察和免疫印迹法检验膜的纯度.结果显示,与组织匀浆成分相比,质膜富集了20倍,线粒体的污染减少了约50%.提取的蛋白质用二/一维凝胶电泳(2DE/1DE)分离、胰酶酶解、电喷雾四极杆飞行时间质谱(ESI-Q-TOF)和基质辅助激光解吸飞行时间串联质谱(MALDI-TOF-TOF)鉴定,或者提取的蛋白质直接进行溶液内酶解、液相色谱串联电喷雾离子阱质谱(LC-LTQ)(鸟枪法)鉴定.一共鉴定了547个非冗余蛋白质,其中34%为质膜或质膜相关蛋白质.优化和评估了质膜蛋白质组研究的方法,且对鼠肝质膜蛋白质组进行了系统的分析.
    세포질막시세포중중요적세포기,재간공능적발휘중구유비상중요적작용.사용자당밀도제도리심순화세포질막,통과전자현미경관찰화면역인적법검험막적순도.결과현시,여조직균장성분상비,질막부집료20배,선립체적오염감소료약50%.제취적단백질용이/일유응효전영(2DE/1DE)분리、이매매해、전분무사겁간비행시간질보(ESI-Q-TOF)화기질보조격광해흡비행시간천련질보(MALDI-TOF-TOF)감정,혹자제취적단백질직접진행용액내매해、액상색보천련전분무리자정질보(LC-LTQ)(조창법)감정.일공감정료547개비용여단백질,기중34%위질막혹질막상관단백질.우화화평고료질막단백질조연구적방법,차대서간질막단백질조진행료계통적분석.
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