微生物与感染
微生物與感染
미생물여감염
JOURNAL OF MICROBES AND INFECTION
2007年
4期
202-205
,共4页
林玮%杨宏亮%杨杨%胡宝瑜%董珂%谭立志%郭晓奎
林瑋%楊宏亮%楊楊%鬍寶瑜%董珂%譚立誌%郭曉奎
림위%양굉량%양양%호보유%동가%담립지%곽효규
问号钩端螺旋体%OmpA%疫苗候选基因
問號鉤耑螺鏇體%OmpA%疫苗候選基因
문호구단라선체%OmpA%역묘후선기인
目的 克隆表达和鉴定问号钩端螺旋体(L.interrogans)黄疸出血群赖型赖株中一个新的外膜蛋白(Omp)A家族基因LA0301,研究LA0301编码蛋白的抗原性和在15个钩端螺旋体(简称钩体)血清群代表株中的保守性,探讨其在疫苗研究中的意义.方法 生物信息学软件分析预测LA0301的特征.构建原核表达重组体pQE31-LA0301,经IPTG诱导后用十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDs-PAGE)及蛋白质印迹法(Western blot)鉴定表达情况.用表达的重组蛋白免疫BALB/c小鼠,Western印迹检测其免疫反应性和在不同血清型钩体中的保守性.酶联免疫吸附试验(ELISA)和Western印迹检测兔抗钩体全菌血清中的LA0301编码蛋白的抗体.结果 生物信息学预测结果显示,LA0301具有OmpA家族的结构域.克隆表达了重组质粒pQE31-LA0301,重组蛋白能刺激BALB/e小鼠产生特异性抗体,效价为1:32000.在兔抗钩体全菌血清中检测到特异的LA0301蛋白抗体,并在15个血清群的代表株钩体中均可检测到LA0301蛋白.结论 LA0301蛋白是问号钩体中一个新的OmpA家族蛋白,具有良好的抗原性和保守性,并且能在钩体感染的过程中刺激机体产生相应的抗体.为进一步研究钩体新型疫苗候选基因奠定了基础.
目的 剋隆錶達和鑒定問號鉤耑螺鏇體(L.interrogans)黃疸齣血群賴型賴株中一箇新的外膜蛋白(Omp)A傢族基因LA0301,研究LA0301編碼蛋白的抗原性和在15箇鉤耑螺鏇體(簡稱鉤體)血清群代錶株中的保守性,探討其在疫苗研究中的意義.方法 生物信息學軟件分析預測LA0301的特徵.構建原覈錶達重組體pQE31-LA0301,經IPTG誘導後用十二烷基磺痠鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDs-PAGE)及蛋白質印跡法(Western blot)鑒定錶達情況.用錶達的重組蛋白免疫BALB/c小鼠,Western印跡檢測其免疫反應性和在不同血清型鉤體中的保守性.酶聯免疫吸附試驗(ELISA)和Western印跡檢測兔抗鉤體全菌血清中的LA0301編碼蛋白的抗體.結果 生物信息學預測結果顯示,LA0301具有OmpA傢族的結構域.剋隆錶達瞭重組質粒pQE31-LA0301,重組蛋白能刺激BALB/e小鼠產生特異性抗體,效價為1:32000.在兔抗鉤體全菌血清中檢測到特異的LA0301蛋白抗體,併在15箇血清群的代錶株鉤體中均可檢測到LA0301蛋白.結論 LA0301蛋白是問號鉤體中一箇新的OmpA傢族蛋白,具有良好的抗原性和保守性,併且能在鉤體感染的過程中刺激機體產生相應的抗體.為進一步研究鉤體新型疫苗候選基因奠定瞭基礎.
목적 극륭표체화감정문호구단라선체(L.interrogans)황달출혈군뢰형뢰주중일개신적외막단백(Omp)A가족기인LA0301,연구LA0301편마단백적항원성화재15개구단라선체(간칭구체)혈청군대표주중적보수성,탐토기재역묘연구중적의의.방법 생물신식학연건분석예측LA0301적특정.구건원핵표체중조체pQE31-LA0301,경IPTG유도후용십이완기광산납-취병희선알응효전영(SDs-PAGE)급단백질인적법(Western blot)감정표체정황.용표체적중조단백면역BALB/c소서,Western인적검측기면역반응성화재불동혈청형구체중적보수성.매련면역흡부시험(ELISA)화Western인적검측토항구체전균혈청중적LA0301편마단백적항체.결과 생물신식학예측결과현시,LA0301구유OmpA가족적결구역.극륭표체료중조질립pQE31-LA0301,중조단백능자격BALB/e소서산생특이성항체,효개위1:32000.재토항구체전균혈청중검측도특이적LA0301단백항체,병재15개혈청군적대표주구체중균가검측도LA0301단백.결론 LA0301단백시문호구체중일개신적OmpA가족단백,구유량호적항원성화보수성,병차능재구체감염적과정중자격궤체산생상응적항체.위진일보연구구체신형역묘후선기인전정료기출.
