分子植物育种
分子植物育種
분자식물육충
MOLECULAR PLANT BREEDING
2008年
1期
165-169
,共5页
于力%朱龙英%万延慧%杨少军%朱为民%薛林宝
于力%硃龍英%萬延慧%楊少軍%硃為民%薛林寶
우력%주룡영%만연혜%양소군%주위민%설림보
番茄%Ty-1%多重PCR%分子标记
番茄%Ty-1%多重PCR%分子標記
번가%Ty-1%다중PCR%분자표기
利用同一PCR反应体系,对分别与番茄(Lycopersion esculentum)抗黄化曲叶病毒(Tomato YellowLeaf Curl virus)病的Ty-1基因和番茄抗根结线虫(root-knot nematode)的Mi基因紧密连锁的SCAR标记进行同时扩增筛选,扩增的特异性片段与单引物扩增片段完全吻合.与Ty-1基因紧密连锁的SCAR1标记为共显性标记,抗感材料均产生398 bp的特异片段,纯合和杂合抗病基因型存在TaqⅠ酶切位点,酶切后分别产生了303 bp和95 bp以及398 bp、303 bp和95 bp的特异性片段,而感病基因型无此酶切位点.与Mi基因紧密连锁的SCAR2标记也为共显性标记,抗感材料均产生750 bp的特异片段,纯合和杂合抗病基因型存在TaqⅠ酶切位点,酶切后分别产生了570bp和180bp以及750bp、570bp和180bp的特异性片段,而感病基因型无此酶切位点.酶切结果仍为750 bp的产物.经反复验证,结果准确可靠,可以用于在同一PCR反应体系中对两个抗病基因进行同时筛选鉴定.
利用同一PCR反應體繫,對分彆與番茄(Lycopersion esculentum)抗黃化麯葉病毒(Tomato YellowLeaf Curl virus)病的Ty-1基因和番茄抗根結線蟲(root-knot nematode)的Mi基因緊密連鎖的SCAR標記進行同時擴增篩選,擴增的特異性片段與單引物擴增片段完全吻閤.與Ty-1基因緊密連鎖的SCAR1標記為共顯性標記,抗感材料均產生398 bp的特異片段,純閤和雜閤抗病基因型存在TaqⅠ酶切位點,酶切後分彆產生瞭303 bp和95 bp以及398 bp、303 bp和95 bp的特異性片段,而感病基因型無此酶切位點.與Mi基因緊密連鎖的SCAR2標記也為共顯性標記,抗感材料均產生750 bp的特異片段,純閤和雜閤抗病基因型存在TaqⅠ酶切位點,酶切後分彆產生瞭570bp和180bp以及750bp、570bp和180bp的特異性片段,而感病基因型無此酶切位點.酶切結果仍為750 bp的產物.經反複驗證,結果準確可靠,可以用于在同一PCR反應體繫中對兩箇抗病基因進行同時篩選鑒定.
이용동일PCR반응체계,대분별여번가(Lycopersion esculentum)항황화곡협병독(Tomato YellowLeaf Curl virus)병적Ty-1기인화번가항근결선충(root-knot nematode)적Mi기인긴밀련쇄적SCAR표기진행동시확증사선,확증적특이성편단여단인물확증편단완전문합.여Ty-1기인긴밀련쇄적SCAR1표기위공현성표기,항감재료균산생398 bp적특이편단,순합화잡합항병기인형존재TaqⅠ매절위점,매절후분별산생료303 bp화95 bp이급398 bp、303 bp화95 bp적특이성편단,이감병기인형무차매절위점.여Mi기인긴밀련쇄적SCAR2표기야위공현성표기,항감재료균산생750 bp적특이편단,순합화잡합항병기인형존재TaqⅠ매절위점,매절후분별산생료570bp화180bp이급750bp、570bp화180bp적특이성편단,이감병기인형무차매절위점.매절결과잉위750 bp적산물.경반복험증,결과준학가고,가이용우재동일PCR반응체계중대량개항병기인진행동시사선감정.
