中国农学通报
中國農學通報
중국농학통보
CHINESE AGRICULTURAL SCIENCE BULLETIN
2007年
12期
311-315
,共5页
王宝华%翁琴云%汤重淼%鲁国东%王宗华
王寶華%翁琴雲%湯重淼%魯國東%王宗華
왕보화%옹금운%탕중묘%로국동%왕종화
稻瘟病菌%Pot2%rep-PCR%有性后代随机群体
稻瘟病菌%Pot2%rep-PCR%有性後代隨機群體
도온병균%Pot2%rep-PCR%유성후대수궤군체
构建稻瘟病菌有性后代随机群体是研究目的基因遗传特点,乃至克隆目的基因的重要基础,但是在建立有性后代随机群体时,可能会有无性后代污染.采用先分离单个子囊,待其长成菌落并产生分生孢子后,再分离单个萌发的分生孢子的方法构建稻瘟病菌有性后代随机群体.利用基于重复DNA序列Pot2的rep-PCR方法对分离得到的有性后代进行DNA指纹分析,并评价构建的稻瘟病菌有性后代群体的质量.结果表明,构建的有性后代随机群体共包含176个后代.每个后代个体的DNA指纹图谱均与两亲本的DNA指纹图谱不一致;有性后代之间的DNA指纹图谱也彼此不一样,说明得到的有性后代个体都是由子囊孢子萌发形成的,且分离自不同的子囊.GUY11的rep-PCR扩增片段中的5个特异性片段的分离比例也都符合1:1的期望值,是按单个位点标记分离的,与已知的结果相吻合,说明有性后代随机群体的质量较高,不存在偏离现象,是一个较为理想的群体.同时,研究结果还得出基于Pot2的rep-PCR方法可以用来快速评价稻瘟病菌有性后代群体的质量.
構建稻瘟病菌有性後代隨機群體是研究目的基因遺傳特點,迺至剋隆目的基因的重要基礎,但是在建立有性後代隨機群體時,可能會有無性後代汙染.採用先分離單箇子囊,待其長成菌落併產生分生孢子後,再分離單箇萌髮的分生孢子的方法構建稻瘟病菌有性後代隨機群體.利用基于重複DNA序列Pot2的rep-PCR方法對分離得到的有性後代進行DNA指紋分析,併評價構建的稻瘟病菌有性後代群體的質量.結果錶明,構建的有性後代隨機群體共包含176箇後代.每箇後代箇體的DNA指紋圖譜均與兩親本的DNA指紋圖譜不一緻;有性後代之間的DNA指紋圖譜也彼此不一樣,說明得到的有性後代箇體都是由子囊孢子萌髮形成的,且分離自不同的子囊.GUY11的rep-PCR擴增片段中的5箇特異性片段的分離比例也都符閤1:1的期望值,是按單箇位點標記分離的,與已知的結果相吻閤,說明有性後代隨機群體的質量較高,不存在偏離現象,是一箇較為理想的群體.同時,研究結果還得齣基于Pot2的rep-PCR方法可以用來快速評價稻瘟病菌有性後代群體的質量.
구건도온병균유성후대수궤군체시연구목적기인유전특점,내지극륭목적기인적중요기출,단시재건립유성후대수궤군체시,가능회유무성후대오염.채용선분리단개자낭,대기장성균락병산생분생포자후,재분리단개맹발적분생포자적방법구건도온병균유성후대수궤군체.이용기우중복DNA서렬Pot2적rep-PCR방법대분리득도적유성후대진행DNA지문분석,병평개구건적도온병균유성후대군체적질량.결과표명,구건적유성후대수궤군체공포함176개후대.매개후대개체적DNA지문도보균여량친본적DNA지문도보불일치;유성후대지간적DNA지문도보야피차불일양,설명득도적유성후대개체도시유자낭포자맹발형성적,차분리자불동적자낭.GUY11적rep-PCR확증편단중적5개특이성편단적분리비례야도부합1:1적기망치,시안단개위점표기분리적,여이지적결과상문합,설명유성후대수궤군체적질량교고,불존재편리현상,시일개교위이상적군체.동시,연구결과환득출기우Pot2적rep-PCR방법가이용래쾌속평개도온병균유성후대군체적질량.
