天然产物研究与开发
天然產物研究與開髮
천연산물연구여개발
NATURAL PRODUCT RESEARCH AND DEVELOPMENT
2007年
5期
776-780
,共5页
邓婷%纪伟%连霁虹%郭雷%胡蔚蓉%龚邦强
鄧婷%紀偉%連霽虹%郭雷%鬍蔚蓉%龔邦彊
산정%기위%련제홍%곽뢰%호위용%공방강
载脂蛋白ApoA-Ⅰ%apoA-Ⅰ启动子%荧光素酶报告基因%药物筛选%降脂中药
載脂蛋白ApoA-Ⅰ%apoA-Ⅰ啟動子%熒光素酶報告基因%藥物篩選%降脂中藥
재지단백ApoA-Ⅰ%apoA-Ⅰ계동자%형광소매보고기인%약물사선%강지중약
PCR扩增含有apoA-Ⅰ基因的转录调控序列的启动子片断(376 bp),克隆人含有荧光素酶报告基因和新霉素抗性基因的pGL3B-neo载体中,构成受apoA-Ⅰ启动子调控的重组报告基因质粒pGL3B-neo::apo,稳定转染人肝癌细胞株HepG2.通过细胞有限稀释法筛选稳定表达荧光素酶活性的细胞株SAPOA-Ⅰ.经apoA-Ⅰ转录调控因子PPARα激动剂的鉴定和细胞接种密度、溶剂使用浓度等条件的优化,成功建立了靶向spoA-Ⅰ基因启动子转录活性的报告基因筛选体系.应用该体系对400多种降脂中药提取物进行筛选,泽泻、罗布麻叶、山楂等提取物显示出较好的上调活性,与文献报道采用动物模型研究的结果一致.
PCR擴增含有apoA-Ⅰ基因的轉錄調控序列的啟動子片斷(376 bp),剋隆人含有熒光素酶報告基因和新黴素抗性基因的pGL3B-neo載體中,構成受apoA-Ⅰ啟動子調控的重組報告基因質粒pGL3B-neo::apo,穩定轉染人肝癌細胞株HepG2.通過細胞有限稀釋法篩選穩定錶達熒光素酶活性的細胞株SAPOA-Ⅰ.經apoA-Ⅰ轉錄調控因子PPARα激動劑的鑒定和細胞接種密度、溶劑使用濃度等條件的優化,成功建立瞭靶嚮spoA-Ⅰ基因啟動子轉錄活性的報告基因篩選體繫.應用該體繫對400多種降脂中藥提取物進行篩選,澤瀉、囉佈痳葉、山楂等提取物顯示齣較好的上調活性,與文獻報道採用動物模型研究的結果一緻.
PCR확증함유apoA-Ⅰ기인적전록조공서렬적계동자편단(376 bp),극륭인함유형광소매보고기인화신매소항성기인적pGL3B-neo재체중,구성수apoA-Ⅰ계동자조공적중조보고기인질립pGL3B-neo::apo,은정전염인간암세포주HepG2.통과세포유한희석법사선은정표체형광소매활성적세포주SAPOA-Ⅰ.경apoA-Ⅰ전록조공인자PPARα격동제적감정화세포접충밀도、용제사용농도등조건적우화,성공건립료파향spoA-Ⅰ기인계동자전록활성적보고기인사선체계.응용해체계대400다충강지중약제취물진행사선,택사、라포마협、산사등제취물현시출교호적상조활성,여문헌보도채용동물모형연구적결과일치.
