CAJ | 학술논문

基于高分辨率、高精度、高灵敏度及良好表现力的多级质谱,以标准糖蛋白辣根过氧化物酶(HRP)、核糖核酸酶B(RNase B)为对象,探索了糖蛋白质谱分析前样品处理的技术流程.通过对糖蛋白样品前处理的各个步骤(包括蛋白变性方法(RNase B适合化学变性,HRP适合热变性)、酶的选择及条件(RNase B适用内蛋白酶Lys-C酶解,HRP适用胰蛋白酶酶解,酶解时间控制在12～16 h)、提肽液的组成(对于低丰度糖蛋白用50%乙腈-5%三氟乙酸提取)、基质的组成、点样方法("三明治"式))进行了优化,形成了简单易行、无需糖肽富集标记的糖蛋白溶液酶解-质谱分析和胶上分离酶解-质谱分析的技术路线,为实际样品体系中糖蛋白的结构解析提供了可行的方法.
기우고분변솔、고정도、고령민도급량호표현력적다급질보,이표준당단백랄근과양화물매(HRP)、핵당핵산매B(RNase B)위대상,탐색료당단백질보분석전양품처리적기술류정.통과대당단백양품전처리적각개보취(포괄단백변성방법(RNase B괄합화학변성,HRP괄합열변성)、매적선택급조건(RNase B괄용내단백매Lys-C매해,HRP괄용이단백매매해,매해시간공제재12～16 h)、제태액적조성(대우저봉도당단백용50%을정-5%삼불을산제취)、기질적조성、점양방법("삼명치"식))진행료우화,형성료간단역행、무수당태부집표기적당단백용액매해-질보분석화효상분리매해-질보분석적기술로선,위실제양품체계중당단백적결구해석제공료가행적방법.