CAJ | 학술논문

目的探讨EGFR信号通路与人结肠癌Caco-2细胞增殖和侵袭转移的关系及其调控分子机制.方法采用MTT法和Boyden小室体外侵袭实验检测Caco-2细胞增殖和体外侵袭能力;采用RT-PCR方法检测MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2基因转录水平;采用Western blot法检测P-EGFR和P-ERK蛋白表达.结果外源性EGF(10μg/L)增加P-EGFR和P-ERK蛋白表达同时使24 h细胞生长率提高了23.35%(P＜0.01),使过膜细胞数由(208±3)上升到(241±5)(P＜0.01).当用AG1478(20 μmol/L)和PD98059(40 μmol/L)分别阻断EGFR和ERK/MAPK后,EGF作用消失,Caco-2细胞生长明显抑制(P＜0.01),但无时间效应关系;Caco-2细胞体外侵袭力明显减弱(P＜0.01).RT-PCR测定显示,EGF能增加Caco-2细胞MMP-2、MMP-9 mRNA的表达和减少TIMP-1和TIMP-2 mRNA的表达;而AG1478能逆转EGF的作用,使MMP-2、MMP-9 mRNA的表达下降,TIMP-1和TIMP-2 mRNA的表达上升,结果MMP-2/TIMP-2比值和MMP-9/TIMP-1比值均下降(P＜0.01).结论EGFR-ERK/MAPK信号通路通过改变基质金属蛋白酶和其抑制剂mRNA比值调控人结肠癌细胞侵袭转移能力.
목적탐토EGFR신호통로여인결장암Caco-2세포증식화침습전이적관계급기조공분자궤제.방법채용MTT법화Boyden소실체외침습실험검측Caco-2세포증식화체외침습능력;채용RT-PCR방법검측MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2기인전록수평;채용Western blot법검측P-EGFR화P-ERK단백표체.결과외원성EGF(10μg/L)증가P-EGFR화P-ERK단백표체동시사24 h세포생장솔제고료23.35%(P＜0.01),사과막세포수유(208±3)상승도(241±5)(P＜0.01).당용AG1478(20 μmol/L)화PD98059(40 μmol/L)분별조단EGFR화ERK/MAPK후,EGF작용소실,Caco-2세포생장명현억제(P＜0.01),단무시간효응관계;Caco-2세포체외침습력명현감약(P＜0.01).RT-PCR측정현시,EGF능증가Caco-2세포MMP-2、MMP-9 mRNA적표체화감소TIMP-1화TIMP-2 mRNA적표체;이AG1478능역전EGF적작용,사MMP-2、MMP-9 mRNA적표체하강,TIMP-1화TIMP-2 mRNA적표체상승,결과MMP-2/TIMP-2비치화MMP-9/TIMP-1비치균하강(P＜0.01).결론EGFR-ERK/MAPK신호통로통과개변기질금속단백매화기억제제mRNA비치조공인결장암세포침습전이능력.