中国媒介生物学及控制杂志
中國媒介生物學及控製雜誌
중국매개생물학급공제잡지
CHINESE JOURNAL OF VECTOR BIOLOGY AND CONTROL
2006年
2期
86-89
,共4页
段金花%林立丰%蔡松武%卢文成%郑夔%易建荣
段金花%林立豐%蔡鬆武%盧文成%鄭夔%易建榮
단금화%림립봉%채송무%로문성%정기%역건영
白纹伊蚊%登革-2型病毒%TaqMan MGB探针%实时聚合酶链反应
白紋伊蚊%登革-2型病毒%TaqMan MGB探針%實時聚閤酶鏈反應
백문이문%등혁-2형병독%TaqMan MGB탐침%실시취합매련반응
目的初步研究TaqMan MGB探针实时聚合酶链反应(TaqMan MGB Real-time PCR)检测白纹伊蚊登革病毒的敏感性,建立一种敏感、特异、重复性好的登革病毒(Dengue virus,DV)鉴定方法.方法在实验室使雌性白纹伊蚊人工感染Den-2型病毒,设不同的感染蚊虫浓度(只/500μl或只/1 000μl)和不同的分组方法(不加未染毒的蚊虫、分别用未染毒的实验室饲养的雌性白纹伊蚊补加到每份标本10、25、50只/组),利用一步法和二步法TaqMan MGB PCR检测,根据荧光信号判断结果.结果二步法TaqMan MGB PCR可检测到标本中感染蚊虫的最低浓度为2只/500μl和3只/1 000μl,一步法TaqMan MGB PCR可检测到标本中感染蚊虫的最低浓度为5只/500μl,蚊自身的RNA对登革病毒RNA的检测敏感性并无明显的影响.结论 TaqMan MGB探针检测白纹伊蚊体内的DV敏感度高,特异性好,是白纹伊蚊携带登革病毒指数较理想的监测方法,标本较好的处理方法为500 μl标本处理液研磨20～30只/组,TaqMan MGBReal-time PCR最好采用二步法.
目的初步研究TaqMan MGB探針實時聚閤酶鏈反應(TaqMan MGB Real-time PCR)檢測白紋伊蚊登革病毒的敏感性,建立一種敏感、特異、重複性好的登革病毒(Dengue virus,DV)鑒定方法.方法在實驗室使雌性白紋伊蚊人工感染Den-2型病毒,設不同的感染蚊蟲濃度(隻/500μl或隻/1 000μl)和不同的分組方法(不加未染毒的蚊蟲、分彆用未染毒的實驗室飼養的雌性白紋伊蚊補加到每份標本10、25、50隻/組),利用一步法和二步法TaqMan MGB PCR檢測,根據熒光信號判斷結果.結果二步法TaqMan MGB PCR可檢測到標本中感染蚊蟲的最低濃度為2隻/500μl和3隻/1 000μl,一步法TaqMan MGB PCR可檢測到標本中感染蚊蟲的最低濃度為5隻/500μl,蚊自身的RNA對登革病毒RNA的檢測敏感性併無明顯的影響.結論 TaqMan MGB探針檢測白紋伊蚊體內的DV敏感度高,特異性好,是白紋伊蚊攜帶登革病毒指數較理想的鑑測方法,標本較好的處理方法為500 μl標本處理液研磨20～30隻/組,TaqMan MGBReal-time PCR最好採用二步法.
목적초보연구TaqMan MGB탐침실시취합매련반응(TaqMan MGB Real-time PCR)검측백문이문등혁병독적민감성,건립일충민감、특이、중복성호적등혁병독(Dengue virus,DV)감정방법.방법재실험실사자성백문이문인공감염Den-2형병독,설불동적감염문충농도(지/500μl혹지/1 000μl)화불동적분조방법(불가미염독적문충、분별용미염독적실험실사양적자성백문이문보가도매빈표본10、25、50지/조),이용일보법화이보법TaqMan MGB PCR검측,근거형광신호판단결과.결과이보법TaqMan MGB PCR가검측도표본중감염문충적최저농도위2지/500μl화3지/1 000μl,일보법TaqMan MGB PCR가검측도표본중감염문충적최저농도위5지/500μl,문자신적RNA대등혁병독RNA적검측민감성병무명현적영향.결론 TaqMan MGB탐침검측백문이문체내적DV민감도고,특이성호,시백문이문휴대등혁병독지수교이상적감측방법,표본교호적처리방법위500 μl표본처리액연마20～30지/조,TaqMan MGBReal-time PCR최호채용이보법.
