徐州医学院学报
徐州醫學院學報
서주의학원학보
ACTA ACADEMIAE MEDICINAE XUZHOU
2006年
2期
95-97
,共3页
毛立军%郑骏年%郑典宝%郝林%郑宏祥%裴东生
毛立軍%鄭駿年%鄭典寶%郝林%鄭宏祥%裴東生
모립군%정준년%정전보%학림%정굉상%배동생
白细胞介素18%腺病毒载体
白細胞介素18%腺病毒載體
백세포개소18%선병독재체
目的构建人白细胞介素18(IL-18)基因复制缺陷型腺病毒表达载体.方法以质粒pJWIL-18为模板,设计并合成上、下游引物,利用多聚酶链反应(PCR)扩增获得IL-18基因片段,酶切后克隆至pCA13质粒,构建重组质粒pCA13 IL-18.鉴定正确后,将pCA13 IL-18与含有腺病毒右臂的质粒pBHGE3共转染HEK293细胞,9～12天出现病毒空斑.提取重组腺病毒的DNA,进行PCR鉴定.大量扩增后,氯化铯梯度离心纯化腺病毒,测病毒滴度.结果酶切分析、序列测定、PCR验证表明,IL-18基因成功克隆到复制缺陷型腺病毒载体中.结论成功构建了表达人IL-18基因的复制缺陷性腺病毒载体.
目的構建人白細胞介素18(IL-18)基因複製缺陷型腺病毒錶達載體.方法以質粒pJWIL-18為模闆,設計併閤成上、下遊引物,利用多聚酶鏈反應(PCR)擴增穫得IL-18基因片段,酶切後剋隆至pCA13質粒,構建重組質粒pCA13 IL-18.鑒定正確後,將pCA13 IL-18與含有腺病毒右臂的質粒pBHGE3共轉染HEK293細胞,9～12天齣現病毒空斑.提取重組腺病毒的DNA,進行PCR鑒定.大量擴增後,氯化銫梯度離心純化腺病毒,測病毒滴度.結果酶切分析、序列測定、PCR驗證錶明,IL-18基因成功剋隆到複製缺陷型腺病毒載體中.結論成功構建瞭錶達人IL-18基因的複製缺陷性腺病毒載體.
목적구건인백세포개소18(IL-18)기인복제결함형선병독표체재체.방법이질립pJWIL-18위모판,설계병합성상、하유인물,이용다취매련반응(PCR)확증획득IL-18기인편단,매절후극륭지pCA13질립,구건중조질립pCA13 IL-18.감정정학후,장pCA13 IL-18여함유선병독우비적질립pBHGE3공전염HEK293세포,9～12천출현병독공반.제취중조선병독적DNA,진행PCR감정.대량확증후,록화색제도리심순화선병독,측병독적도.결과매절분석、서렬측정、PCR험증표명,IL-18기인성공극륭도복제결함형선병독재체중.결론성공구건료표체인IL-18기인적복제결함성선병독재체.
