CAJ | 학술논문

[目的]构建人可溶性肿瘤坏死因子受体1基因的重组质粒,进行原核表达.[方法]以Hela细胞的总RNA为模板,用RT-PCR方法扩增sTNFRl全编码区基因片段,构建舍有目的片段的T载体克隆及原核表达载体pMAL-c2x重组质粒亚克隆,经异丙基-β-D半乳糖苷酶(IPTG)诱导重组质拉菌表达sTNFR1,以淀粉树脂亲和层析法纯化重组蛋白,用十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和Western-blotting对重组蛋白进行分析鉴定.[结果]经核苷酸序列测序和Western-blot鉴定,成功构建了人sTNFR1重组质粒基因工程菌,表达了具有sTNFR1免疫活性的融合蛋白.[结论]构建了人sTNFR1重组质粒克隆,获得了具有sTNFR1的免疫活性的融合蛋白,为今后的研究打下了基础.
[목적]구건인가용성종류배사인자수체1기인적중조질립,진행원핵표체.[방법]이Hela세포적총RNA위모판,용RT-PCR방법확증sTNFRl전편마구기인편단,구건사유목적편단적T재체극륭급원핵표체재체pMAL-c2x중조질립아극륭,경이병기-β-D반유당감매(IPTG)유도중조질랍균표체sTNFR1,이정분수지친화층석법순화중조단백,용십이완기류산납취병희선알응효전영(SDS-PAGE)화Western-blotting대중조단백진행분석감정.[결과]경핵감산서렬측서화Western-blot감정,성공구건료인sTNFR1중조질립기인공정균,표체료구유sTNFR1면역활성적융합단백.[결론]구건료인sTNFR1중조질립극륭,획득료구유sTNFR1적면역활성적융합단백,위금후적연구타하료기출.