CAJ | 학술논문

目的初步分析日本血吸虫酚氧化酶(pheno1 oxidase,PO)天然蛋白分子的分子量及其亚基组成.方法将42 d龄活成虫置于含0.05%戊巴比妥钠的RPMI 1640培养基中23 C孵育8 h后,PBS(pH 6.8)洗净,分离雌、雄成虫,研磨呈匀浆,超声粉碎、低温高速离心,取上清(含PO)进行聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE),分别在两侧切取胶宽约1 cm进行酶染色,然后用解剖刀准确切下相应的未染色的凝胶.经真空冷冻干燥机冻干后碾成粉末,高速电动匀浆成浆糊状,冷浸过夜,高速离心得上清即为日本血吸虫酚氧化酶粗蛋白,进行SDS-PAGE.利用SDS-PAGE与PAGE(点加1孔预染Mark蛋白)的结果,对照分析酚氧化酶蛋白的可能分子量及其亚基组成.结果 PAGE:日本血吸虫雌虫、雄虫酚氧化酶蛋白均表现为迁移率相同的1条主带,其对应分子量大约为81 kD.SDSPAGE:酚氧化酶粗蛋白共出现5条带,分别为81、64、54、41 kD和27 kD.结论初步分析日本血吸虫雌、雄成虫酚氧化酶天然蛋白分子的分子量及其亚基组成基本相同,可能为单体酶(分子量81kD)或由3个27 kD相同亚基构成的同聚体.其确切的分子特征有待于进一步研究.
목적초보분석일본혈흡충분양화매(pheno1 oxidase,PO)천연단백분자적분자량급기아기조성.방법장42 d령활성충치우함0.05%무파비타납적RPMI 1640배양기중23 C부육8 h후,PBS(pH 6.8)세정,분리자、웅성충,연마정균장,초성분쇄、저온고속리심,취상청(함PO)진행취병희선알응효전영(PAGE),분별재량측절취효관약1 cm진행매염색,연후용해부도준학절하상응적미염색적응효.경진공냉동간조궤동간후년성분말,고속전동균장성장호상,랭침과야,고속리심득상청즉위일본혈흡충분양화매조단백,진행SDS-PAGE.이용SDS-PAGE여PAGE(점가1공예염Mark단백)적결과,대조분석분양화매단백적가능분자량급기아기조성.결과 PAGE:일본혈흡충자충、웅충분양화매단백균표현위천이솔상동적1조주대,기대응분자량대약위81 kD.SDSPAGE:분양화매조단백공출현5조대,분별위81、64、54、41 kD화27 kD.결론초보분석일본혈흡충자、웅성충분양화매천연단백분자적분자량급기아기조성기본상동,가능위단체매(분자량81kD)혹유3개27 kD상동아기구성적동취체.기학절적분자특정유대우진일보연구.