中国公共卫生
中國公共衛生
중국공공위생
CHINA PUBLIC HEALTH
2003年
3期
305-307
,共3页
居丽雯%蒋露芳%甘愉%周联娣%姜庆五%谈兆麟
居麗雯%蔣露芳%甘愉%週聯娣%薑慶五%談兆麟
거려문%장로방%감유%주련제%강경오%담조린
多重逆转录聚合酶链反应%流感病毒%呼吸道合胞病毒
多重逆轉錄聚閤酶鏈反應%流感病毒%呼吸道閤胞病毒
다중역전록취합매련반응%류감병독%호흡도합포병독
目的建立用多重逆转录聚合酶链反应(mRT-PCR)检测甲1型、甲3型、乙型流感病毒以及呼吸道合胞病毒(RSV)A型、B型等主要上呼吸道病毒的方法,以快速检测上呼吸道感染主要病毒及对甲型、甲亚型、乙型流感病毒在上海地区人群感染、流行情况调查.方法采用经MDCK细胞接种培养的甲3型、乙型流感病毒和Hep-2细胞接种培养的RSV A型、B型标准毒株病毒液,以及甲1型、甲3型、乙型流感病毒和RSV A型、B型混合毒株病毒液,使用5组引物,分别为 HA1-5a1和HAl-3a1(甲1型流感病毒)、HA3-5a1和HA3-3a1(甲3型流感病毒)、NP-5b1和NP-3b1(乙型流感病毒)、RSVAF和RSVAR(RSVA型)、RSVBF和RSVBR(RSVB型),经mRT-PCR,琼脂糖凝胶电泳,于紫外灯下观察上述病毒特异核苷酸条带.结果甲1型、甲3型、乙型流感病毒,RSVA型、B型分别在431,210,390,334,183bp处出现清晰的5条DNA条带.结论应用5组引物,mRT-PCR可用于快速检测临床上呼吸道感染标本中的流感病毒和RSV,并可对其进行分型,对上呼吸道病毒感染性疾病的诊断和流感的监测方面是非常重要的.
目的建立用多重逆轉錄聚閤酶鏈反應(mRT-PCR)檢測甲1型、甲3型、乙型流感病毒以及呼吸道閤胞病毒(RSV)A型、B型等主要上呼吸道病毒的方法,以快速檢測上呼吸道感染主要病毒及對甲型、甲亞型、乙型流感病毒在上海地區人群感染、流行情況調查.方法採用經MDCK細胞接種培養的甲3型、乙型流感病毒和Hep-2細胞接種培養的RSV A型、B型標準毒株病毒液,以及甲1型、甲3型、乙型流感病毒和RSV A型、B型混閤毒株病毒液,使用5組引物,分彆為 HA1-5a1和HAl-3a1(甲1型流感病毒)、HA3-5a1和HA3-3a1(甲3型流感病毒)、NP-5b1和NP-3b1(乙型流感病毒)、RSVAF和RSVAR(RSVA型)、RSVBF和RSVBR(RSVB型),經mRT-PCR,瓊脂糖凝膠電泳,于紫外燈下觀察上述病毒特異覈苷痠條帶.結果甲1型、甲3型、乙型流感病毒,RSVA型、B型分彆在431,210,390,334,183bp處齣現清晰的5條DNA條帶.結論應用5組引物,mRT-PCR可用于快速檢測臨床上呼吸道感染標本中的流感病毒和RSV,併可對其進行分型,對上呼吸道病毒感染性疾病的診斷和流感的鑑測方麵是非常重要的.
목적건립용다중역전록취합매련반응(mRT-PCR)검측갑1형、갑3형、을형류감병독이급호흡도합포병독(RSV)A형、B형등주요상호흡도병독적방법,이쾌속검측상호흡도감염주요병독급대갑형、갑아형、을형류감병독재상해지구인군감염、류행정황조사.방법채용경MDCK세포접충배양적갑3형、을형류감병독화Hep-2세포접충배양적RSV A형、B형표준독주병독액,이급갑1형、갑3형、을형류감병독화RSV A형、B형혼합독주병독액,사용5조인물,분별위 HA1-5a1화HAl-3a1(갑1형류감병독)、HA3-5a1화HA3-3a1(갑3형류감병독)、NP-5b1화NP-3b1(을형류감병독)、RSVAF화RSVAR(RSVA형)、RSVBF화RSVBR(RSVB형),경mRT-PCR,경지당응효전영,우자외등하관찰상술병독특이핵감산조대.결과갑1형、갑3형、을형류감병독,RSVA형、B형분별재431,210,390,334,183bp처출현청석적5조DNA조대.결론응용5조인물,mRT-PCR가용우쾌속검측림상상호흡도감염표본중적류감병독화RSV,병가대기진행분형,대상호흡도병독감염성질병적진단화류감적감측방면시비상중요적.