CAJ | 학술논문

目的研究血清和糖皮质激素诱导的蛋白激酶1(SGK1)在高糖诱导人肾小球系膜细胞(HMC)产生结缔组织生长因子(CTGF)中的作用,探讨SGK1在糖尿病肾病(DN)肾小球硬化中的作用机制.方法 HMC分为低糖组(5.5 mmol·L-1 D-葡萄糖)、高糖组(25 mmol·L-1 D-葡萄糖)和甘露醇对照组(19.5 mmol·L-1甘露醇和5.5 mmol·L-1 D-葡萄糖),刺激24、72 h后,采用RT-PCR方法和Western blot方法检测CTGF mRNA及蛋白的表达;将带有SGK1显性激活型突变体质粒(pIRES2-EGFP-S422DhSGK1,SD)和带有SGK1显性失活型突变体质粒(pIRES2-EGFP-K127NhSGK1,KN)分别瞬时转染HMC;同时,设空质粒(pIRES2-EGFP,FP)转染组和未转染组(NT)为对照.分别用低糖(LG,5.5 mmol·L-1 D-葡萄糖)和高糖(HG,25 mmol·L-1 D-葡萄糖)刺激24、72 h后,采用RT-PCR方法和Western blot方法检测CTGF的mRNA及蛋白的表达.结果与低糖组和甘露醇组相比较,在高糖刺激下,HMC中CTGF mRNA及蛋白的表达明显上调;低糖环境下,转染SD的HMC与转染FP、NT组比较,其CTGF mRNA和蛋白的表达明显增加.转染KN的HMC与转染FP、NT组比较,其CTGF mRNA和蛋白的表达差异无显著性;高糖环境下转染SD的HMC与转染KN、转染FP、NT组比较,其CTGF mRNA和蛋白的表达明显增加.转染KN的HMC与转染FP、NT组比较,其CTGF mRNA和蛋白的表达明显减少.结论在DN中,高糖能促进HMC的CTGFmRNA及蛋白的表达,并且可以通过SGK1介导的信号通路来诱导人肾小球系膜细胞增加合成CTGF,这种新发现的信号通路,表明SGK1可能通过促进CTGF的合成来参与糖尿病肾病肾小球纤维化的发生.
목적 연구혈청화당피질격소유도적단백격매1(SGK1)재고당유도인신소구계막세포(HMC)산생결체조직생장인자(CTGF)중적작용,탐토SGK1재당뇨병신병(DN)신소구경화중적작용궤제.방법 HMC분위저당조(5.5 mmol·L-1 D-포도당)、고당조(25 mmol·L-1 D-포도당)화감로순대조조(19.5 mmol·L-1감로순화5.5 mmol·L-1 D-포도당),자격24、72 h후,채용RT-PCR방법화Western blot방법검측CTGF mRNA급단백적표체;장대유SGK1현성격활형돌변체질립(pIRES2-EGFP-S422DhSGK1,SD)화대유SGK1현성실활형돌변체질립(pIRES2-EGFP-K127NhSGK1,KN)분별순시전염HMC;동시,설공질립(pIRES2-EGFP,FP)전염조화미전염조(NT)위대조.분별용저당(LG,5.5 mmol·L-1 D-포도당)화고당(HG,25 mmol·L-1 D-포도당)자격24、72 h후,채용RT-PCR방법화Western blot방법검측CTGF적mRNA급단백적표체.결과 여저당조화감로순조상비교,재고당자격하,HMC중CTGF mRNA급단백적표체명현상조;저당배경하,전염SD적HMC여전염FP、NT조비교,기CTGF mRNA화단백적표체명현증가.전염KN적HMC여전염FP、NT조비교,기CTGF mRNA화단백적표체차이무현저성;고당배경하전염SD적HMC여전염KN、전염FP、NT조비교,기CTGF mRNA화단백적표체명현증가.전염KN적HMC여전염FP、NT조비교,기CTGF mRNA화단백적표체명현감소.결론 재DN중,고당능촉진HMC적CTGFmRNA급단백적표체,병차가이통과SGK1개도적신호통로래유도인신소구계막세포증가합성CTGF,저충신발현적신호통로,표명SGK1가능통과촉진CTGF적합성래삼여당뇨병신병신소구섬유화적발생.