西北农林科技大学学报（自然科学版）
西北農林科技大學學報（自然科學版）
서북농림과기대학학보（자연과학판）
JOURNAL OF NORTHWEST SCI-TECH UNIVERSITY OF AGRICULTURE AND FORESTRY(NATURAL SCIENCE EDITION)
2007年
8期
24-28
,共5页
苏凤艳%宗春苗%王卓聪%丁庆东%王全凯
囌鳳豔%宗春苗%王卓聰%丁慶東%王全凱
소봉염%종춘묘%왕탁총%정경동%왕전개
水貂%犬瘟热病毒%F基因%真核表达
水貂%犬瘟熱病毒%F基因%真覈錶達
수초%견온열병독%F기인%진핵표체
为了构建犬瘟热病毒F基因真核表达载体,利用RT-PCR方法扩增出水貂源犬瘟热病毒分离株的F基因,将其克隆至pMD-18T载体上,用BamH Ⅰ和KpnⅠ进行双酶切,回收目的基因.将目的基因亚克隆至pcDNA3.1(+)中,获得真核重组质粒pcDNA3.1-CDVF.通过脂质体介导法将pcDNA3.1-CDVF转染至BHK-21细胞中,并利用间接免疫荧光试验和RT-PCR法检测pcDNA3.1-CDVF在BHK-21细胞中的表达情况.结果表明,真核重组表达质粒pcDNA3.1-CDVF构建成功,F基因可在BHK-21细胞中表达.
為瞭構建犬瘟熱病毒F基因真覈錶達載體,利用RT-PCR方法擴增齣水貂源犬瘟熱病毒分離株的F基因,將其剋隆至pMD-18T載體上,用BamH Ⅰ和KpnⅠ進行雙酶切,迴收目的基因.將目的基因亞剋隆至pcDNA3.1(+)中,穫得真覈重組質粒pcDNA3.1-CDVF.通過脂質體介導法將pcDNA3.1-CDVF轉染至BHK-21細胞中,併利用間接免疫熒光試驗和RT-PCR法檢測pcDNA3.1-CDVF在BHK-21細胞中的錶達情況.結果錶明,真覈重組錶達質粒pcDNA3.1-CDVF構建成功,F基因可在BHK-21細胞中錶達.
위료구건견온열병독F기인진핵표체재체,이용RT-PCR방법확증출수초원견온열병독분리주적F기인,장기극륭지pMD-18T재체상,용BamH Ⅰ화KpnⅠ진행쌍매절,회수목적기인.장목적기인아극륭지pcDNA3.1(+)중,획득진핵중조질립pcDNA3.1-CDVF.통과지질체개도법장pcDNA3.1-CDVF전염지BHK-21세포중,병이용간접면역형광시험화RT-PCR법검측pcDNA3.1-CDVF재BHK-21세포중적표체정황.결과표명,진핵중조표체질립pcDNA3.1-CDVF구건성공,F기인가재BHK-21세포중표체.
