免疫学杂志
免疫學雜誌
면역학잡지
IMMUNOLOGICAL JOURNAL
2000年
2期
92-95
,共4页
赵泽国%杨治华%冉宇靓%刘军%孙立新%董志伟
趙澤國%楊治華%冉宇靚%劉軍%孫立新%董誌偉
조택국%양치화%염우정%류군%손립신%동지위
人VEGF165%单链抗体%原核表达
人VEGF165%單鏈抗體%原覈錶達
인VEGF165%단련항체%원핵표체
目的为降低鼠源抗体对人体的免疫原性,构建表达了VmD11的单链抗体.方法用overlap PCR构建出单链抗体的基因,克隆入表达载体pKpL-3a,在大肠杆菌pop2136中表达,采用抗原结合ELISA和竞争抑制ELISA测定活性.结果经SDS PAGE检测,诱导后的细菌表达了26kD的蛋白;Western Blot证实该蛋白为表达的单链抗体.经变性、复性后,该单链抗体可特异结合人VEGF1 65抗原,并与VmD11具有相同的抗原结合位点.结论成功构建和表达了抗人VEGF165单链抗体,可望进一步应用于肿瘤复发转移的诊治研究.
目的為降低鼠源抗體對人體的免疫原性,構建錶達瞭VmD11的單鏈抗體.方法用overlap PCR構建齣單鏈抗體的基因,剋隆入錶達載體pKpL-3a,在大腸桿菌pop2136中錶達,採用抗原結閤ELISA和競爭抑製ELISA測定活性.結果經SDS PAGE檢測,誘導後的細菌錶達瞭26kD的蛋白;Western Blot證實該蛋白為錶達的單鏈抗體.經變性、複性後,該單鏈抗體可特異結閤人VEGF1 65抗原,併與VmD11具有相同的抗原結閤位點.結論成功構建和錶達瞭抗人VEGF165單鏈抗體,可望進一步應用于腫瘤複髮轉移的診治研究.
목적위강저서원항체대인체적면역원성,구건표체료VmD11적단련항체.방법용overlap PCR구건출단련항체적기인,극륭입표체재체pKpL-3a,재대장간균pop2136중표체,채용항원결합ELISA화경쟁억제ELISA측정활성.결과경SDS PAGE검측,유도후적세균표체료26kD적단백;Western Blot증실해단백위표체적단련항체.경변성、복성후,해단련항체가특이결합인VEGF1 65항원,병여VmD11구유상동적항원결합위점.결론성공구건화표체료항인VEGF165단련항체,가망진일보응용우종류복발전이적진치연구.
