山东农业大学学报(自然科学版)
山東農業大學學報(自然科學版)
산동농업대학학보(자연과학판)
JOURNAL OF SHANDONG AGRUCULTURAL UNIVERSITY
2003年
1期
19-23
,共5页
韩红岩%崔德才%张岳民%刘天臻
韓紅巖%崔德纔%張嶽民%劉天臻
한홍암%최덕재%장악민%류천진
Dip法%PLDγ基因%拟南芥
Dip法%PLDγ基因%擬南芥
Dip법%PLDγ기인%의남개
在含反义PLDγ基因的质粒根癌农杆菌的介导下,以生长到初果期的健壮拟南芥植株为转基因材料,用Dip法进行转基因实验,对影响转化率的浸染条件进行了比较研究.适宜的转化条件是将拟南芥的整个花序浸泡于农杆菌悬浮液中(含5%蔗糖,0.04%吐温-80),每次浸染10min,间隔3天浸染一次,共浸染3次.每次浸染后将植株横放于暗箱中24h,再置于22~24℃的光照下正常生长.待种子收获后在含有卡那霉素70mg/L的选择培养基中选择转化植株.PCR 及PCR-Southern blot 分析检测,该方法的转化率每100粒种子可高达2%.
在含反義PLDγ基因的質粒根癌農桿菌的介導下,以生長到初果期的健壯擬南芥植株為轉基因材料,用Dip法進行轉基因實驗,對影響轉化率的浸染條件進行瞭比較研究.適宜的轉化條件是將擬南芥的整箇花序浸泡于農桿菌懸浮液中(含5%蔗糖,0.04%吐溫-80),每次浸染10min,間隔3天浸染一次,共浸染3次.每次浸染後將植株橫放于暗箱中24h,再置于22~24℃的光照下正常生長.待種子收穫後在含有卡那黴素70mg/L的選擇培養基中選擇轉化植株.PCR 及PCR-Southern blot 分析檢測,該方法的轉化率每100粒種子可高達2%.
재함반의PLDγ기인적질립근암농간균적개도하,이생장도초과기적건장의남개식주위전기인재료,용Dip법진행전기인실험,대영향전화솔적침염조건진행료비교연구.괄의적전화조건시장의남개적정개화서침포우농간균현부액중(함5%자당,0.04%토온-80),매차침염10min,간격3천침염일차,공침염3차.매차침염후장식주횡방우암상중24h,재치우22~24℃적광조하정상생장.대충자수획후재함유잡나매소70mg/L적선택배양기중선택전화식주.PCR 급PCR-Southern blot 분석검측,해방법적전화솔매100립충자가고체2%.